2.2.5 抗体特异性测定

    选择与RHE具有醌类母核或羧基等类似结构的化合物，通过间接竞争ELISA测定多抗血清对不同竞争物的IC50值。以多抗血清对RHE的IC50与多抗血清对竞争物的IC50比值作为交叉反应率(CR)[16]，并以CR反映多抗血清的特异性。

    2.3 大黄酸含量测定

    2.3.1 HPLC测定

    准确称取大黄酸标准品0.10 mg，用甲醇配制50 μg/mL标准品溶液2 mL。取大黄饮片粉碎，称取大黄粉末1.00 g，加30 mL甲醇超声30 min，过滤，重复2次，合并滤液，浓缩，甲醇定容至成10 mL，即为大黄供试品溶液。参考2015年版《中华人民共和国药典》(一部)，选用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，流动相为甲醇- 0.1%磷酸溶液(85∶15)，检测波长 254 nm，进样量10 μL。取标准品溶液1 mL，以甲醇配成50、45、35、30、25、20、15、10 μg/mL 8个浓度，绘制标准曲线 ......