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编号:13228202
益气解毒方对鼻咽癌细胞标志物T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1及Ras相关C3肉毒素底物1表达的影响(2)
http://www.100md.com 2018年5月1日 《中国中医药信息杂志》 2018年第5期
     小牛血清,杭州四季青生物制品有限公司;胰蛋白酶,美国Difco公司;cDNA反转录试剂盒,美国MBI公司;HRP(sp-9001-3ml)标记二抗,北京康为生物试剂公司;兔抗人Tiam1(H-300)蛋白单克隆抗体,美国Santa Cruz公司;鼠抗人Rac1(610650)蛋白单克隆抗体,即用型非生物素免疫组化EliVision plus檢测试剂盒,福州迈新公司;PBS、Trizol试剂、PCR反应试剂盒,上海生工生物工程有限公司。多通道PCR仪(美国MJ PTC-220),双光束紫外分光光度计(美国LAMBDA BIO 20),凝胶电泳图像分析系统(BIO-RAD GD Doc2000,美国),DNA测序仪(美国ABI3100型)。

    1.4 细胞培养

    将人鼻咽癌5-8F细胞株置于含10%热灭活小牛血清的PRMI1640培养液中37 ℃培养,每毫升含青霉素100 U、链霉素100 ?g,37 ℃、5%CO2培养。PBS冲洗2次,当细胞长满至单层后,加入0.25%胰蛋白酶1 mL消化贴壁细胞。血清培养终止消化,细胞收集置离心管离心,细胞传代2~3次,取对数生长期细胞用于实验,调整细胞数为5×105/mL备用 ......
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