本试验比较了5种不同类型的色谱柱(Ultimate XB-C18、Shim-pack VP-ODS、Platisil-ODS、Hypersil-Gold Dim C18、Diamonsil-C18)，最终选择Hypersil-Gold Dim C18色谱柱，可以更好地分离所测定的化合物。测定的4种化合物均含有1个或多个酚羟基，具有一定的酸性，为保证获得较好的峰形，采用酸水作为水相，在预试验中以不同浓度磷酸、甲酸以及冰醋酸进行优化，最终以0.1%甲酸作为水相，可得到较好的色谱峰。本试验以乙腈-0.1%甲酸和甲醇-0.1%甲酸作为流动相进行筛选优化，结果采用乙腈-0.1%甲酸作为流动相时，4种化合物的峰形不够美观且分离度未达到相应要求，而以甲醇-0.1%甲酸作为流动相进行梯度洗脱时，分离度较好且峰形尖锐。没食子酸、苔黑酚葡萄糖苷、没食子酸乙酯、五没食子酰葡萄糖各自的吸收波长为271、272、273、281 nm ......