2.4 Western blot检测肿瘤组织血管内皮细胞生长因子受体-1、2和p-p38、p-JNK蛋白表达

    常规匀浆、裂解、离心提取总蛋白，用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白量，并用组织裂解液将各样品调至相同浓度。进行SDS-PAGE电泳，将分离后的蛋白电转移到PVDF膜上，封闭液室温封闭2 h，分别加入1∶1000稀释的一抗，4 ℃孵育过夜。用TBST液洗膜3次，加辣根过氧化物酶标记的二抗室温孵育1 h。TBST液洗膜3次，加入化学发光底物反应液，ECL曝光成像。用Image J软件进行蛋白灰度分析。

    3 统计学方法

    采用SPSS21.0统计软件进行分析。计量资料以—x±s表示，组间比较采用方差分析或非參数检验，组间两两比较用LSD法。P<0.05表示差异有统计学意义。

    4 结果

    4.1 小鼠一般状况

    接种第5日，小鼠右侧腋窝皮下触及黄豆粒大小肿块，第7日瘤体生长明显加快。随着瘤体的生长，各组均逐渐出现不同程度的毛发脱落、毛发缺少光泽、聚集、反应迟缓和进食量减少等现象。与模型组、顺铂组比较，中药组小鼠更具活力，一般状况优于模型组和顺铂组，生存质量相对较好 ......