采用Trizol法提取总RNA，测定其OD260/OD280均在1.8～2.0之间，反转录为cDNA，PCR扩增IL-2R、IL-4、Caspase-8基因片段。实验所用引物均由宝生物工程(大连)有限公司合成。β-actin F：5'-TGACA GGATGCAGAAGGAGATTAC-3'，R：5'-GAGCCAC CAATCCACACAGA-3'，产物长度102 bp;IL-4 F：5'-TGCACCGAGATGTTTGTACCAGA-3'，R：5'-TTG CGAAGCACCCTGGAAG-3'，产物长度92 bp;IL-2R F：5'-TACAAGAACGGCACCATCCTA-3'，R：5'-TTTCT CGATTTGTCATGGGAC-3'，产物长度94 bp。以β-actin作为内参基因，反应体系及参数依据GoTaq 3-Step RT-qPCR试剂盒说明书设置，相同模板相同基因设3复孔、6次平行实验，得各扩增反应的Ct值。采用样点拟合法分析结果得到目的基因和β-actin的Ct值，以β-actin为内参，用比较Ct值法计算相对表达量 ......