1.9 RT-PCR检测豆蔻酰化蛋白激酶C mRNA表达

    用超纯RNA提取试剂盒提取组织样本中总RNA，实验操作按试剂盒说明书进行。取5 μL RNA，1%琼脂糖凝胶进行电泳，检测RNA的完整性。设计引物MARCKS mRNA，用GAPDH作内参。引物设计见表1。用UltraSYBR Mixture(With ROX)进行扩增，实验操作严格按产品说明书进行。扩增步骤：95 ℃、10 min，95 ℃、15 s，60 ℃、60 s，共45个循环。取5 μL RNA，1%琼脂糖凝胶进行电泳。选取样本cDNA进行5倍梯度稀释，稀释后样品各取2 μL作为模板，分别用目的基因引物和内参基因引物进行扩增，同时60～95 ℃进行融解曲线分析，仪器自动绘制出对应的内参基因和目的基因的标准曲线。根据RT-PCR原始检测结果，用2-ΔΔCt法分析基因的相对表达量。

    1.10 统计学方法

    采用SPSS23.0统计软件进行分析。实验数据以 ±s表示，多组间比较用方差分析，组间两两比较用LSD法。P<0.05表示差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 芪蛭胶囊对模型大鼠脑组织神经功能评分的影响

    除假手术组外 ......