1.2.1.4 诱导实验及样品处理方法

    加药前各孔加入37 ℃的空白KHB 1 ml，置于37 ℃摇床中，10 min后轻轻吸干孔内KHB，以期在不破坏其单层膜的基础上除去细胞表面的杂质。将底物按设定浓度溶解于KHB液中，后加入各孔(48孔板加入100 ml/孔)，置于37 ℃培养箱中，60 min时迅速吸出药物，同时做空白对照(加入空白KHB)。取出一定量的样品，加入等体积的含替硝唑(0.1 mg/ml)的乙腈，混合10 min沉淀蛋白，离心(6 000 g，10 min)一次，取50 ml进板。

    1.2.2 样品测定

    利用探针底物的代谢物(睾酮代谢物为6-羟基睾酮，非那西汀代谢物为对乙酰氨基酚)生成量对CYP3A4和CYP1A2的酶活性进行评价。

    色谱柱为Xterra C18柱(2.1 mm×50 mm，1.7 mm，美国Waters公司)。流动相A为0.1%甲酸-水、B为0.1%甲酸-乙腈，洗脱程序及流动相A-B配比如下：0～0.5 min 95∶5，0.5～1.0 min线性变至5∶95 ......