1.2 主要仪器和试剂

    BSA822电子天平(赛多利斯公司)；Akta avant蛋白纯化系统(GE)；1260高效液相色谱仪(安捷伦公司)；SpectraMax M5多功能酶标仪及SoftMax分析软件(美国Molecular Devices)；PA 800 plus毛细管电泳仪(贝克曼公司)；紫外分光光度计(Thermo Fisher Scientific)。琥珀酸、吐温20(J. T. Baker)；蔗糖、氢氧化钠(湖南尔康制药股份有限公司)；超纯水(自制)。

    1.3 处方DOE设计

    根据单因素实验结果选取蛋白浓度、pH、蔗糖浓度及吐温20浓度用于DOE试验。利用JMP 10.0进行DOE设计，其中蛋白浓度选取3水平、pH为2水平、蔗糖浓度为3水平、吐温20浓度为3水平，共设计18个试验组(表1)。

    1.4 缓冲液置换及稳定性考察

    称取适量的蔗糖、琥珀酸和吐温20溶解于超纯水中，用3 mol/L氢氧化钠调节溶液pH，配制成表1中的不同蔗糖浓度、不同pH和不同吐温20浓度的处方缓冲溶液 ......