来氟米特长效注射剂的制备方法(1)
摘 要 目的：以poloxamer P407和P188为凝胶基质，制备一种适宜皮下注射的长效缓释制剂。方法：以胶凝温度、黏度和溶蚀速率为指标，采用Box-Behnken响应面法优选原位凝胶配方。结果：根据拟合结果使用poloxamer P407和P188分别为21.63%和2.41%时，胶凝温度为34.99 ℃、黏度48.07 cP、溶蚀时间4.47 h，结合固体分散体技术得到释放平稳、7 d累积释放率可达80%以上的皮下原位凝胶注射剂。结论：该模型具有高度显著性，优选处方可以满足长效缓释注射剂的要求。
关键词 poloxamer 原位凝胶 溶蚀 Box-Behnken响应面法
中图分类号：R944.1； R979.5 文献标志码：A 文章编号：1006-1533(2019)11-0061-05
Preparation of leflunomide long-term release injection
XIE Song*
(Central Research Institute， Shanghai Pharmaceuticals Holding Co.， Ltd.， Shanghai 201203， China)
ABSTRACT Objective： To prepare a long-term release subcutaneous injection based on poloxamer P407 and P188. Methods： The gelation temperature， viscosity and dissolution rate were taken as dependent variables and the Box-Behnken response surface method was used to optimize the in situ gel formulation. Results： According to the fitting results， when poloxamer P407 and P188 were used at 21.63% and 2.41%， the gelatinization temperature was at 34.99 ℃， the viscosity was 48.07 cP， and the dissolution time was 4.47 h. Combined with solid dispersion technology， the in situ gel injection has it stable release rate for 7 days， and finally obtained more than 80% accumulative release. Conclusion： The model was highly significant. The optimized formulation can meet the requirements of long-term release injection.
KEY WORDS poloxamer； in situ gel； dissolution； Box-Behnken response surface method
类风湿性关节炎(RA)属于自身免疫性疾病。是一种发病缓慢、伴随炎症的关节疾病，多发于四肢关节[1]。来氟米特是一种免疫调节剂，通常用于治疗RA，其结构为异噁唑类，通过化学合成而得。该药在国内外已上市多年，为口服固体制剂。其代谢产物特立氟胺有两个作用：一是通过抑制二氢乳清酸脱氢酶的活性从而阻断嘧啶的从头合成途径，影响DNA和RNA的合成；二是可抑制酪氨酸激酶的活性和细胞的粘附，并能抑制抗体的产生和分泌[2]。该药临床应用兼具良好的安全性和有效性。
以泊洛沙姆(poloxamer)为基质制备的原位凝胶属温度敏感型。其不同比例的溶液在感受温度变化时会产生溶胶-凝胶之间的可逆转变。又因非毒性和溶液稳定性，使其非常适合作为注射剂的载体[3]。本研究通过Box-Behnken响应面法优选满足皮下注射要求的原位凝胶配方，同时采用固体分散体技术调节释药速率从而达到小剂量来氟米特局部给药一周一次的目的。
1 材料与方法
1.1 仪器
UV-1700紫外分光光度计(岛津仪器(苏州)有限公司)；RV10旋转蒸发仪(艾卡(广州)仪器设备有限公司)；SHA-B数显恒温水浴振荡器(常州国华电气有限公司)；DV-Ⅲ旋转式黏度计(美国博勒飞公司)；CP-225D型电子天平(德国赛多利斯集团)。
1.2 试药
来氟米特(南京康满林化工实业有限公司，批号20160301)；乙基纤维素(泸州北方化学工业有限公司，批号20160403)；poloxamer P407(批号WPWJ554C)、poloxamer P188(批号WPYJ540B)均购自巴斯夫(中国)有限公司；甲醇、乙醇(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 空白凝胶配方优选
1)空白凝胶的制备 应用冷溶法[4]，按处方量量取纯化水，冷藏过夜，取处方比例P407和P188缓慢加入上述冷水中，冷藏至完全溶解，备用。
2)凝胶优选配方评价指标 鉴于项目开发目的是对患处进行局部注射并达到迅速胶凝、长效缓释的目的。故选用胶凝温度(25 ℃)、黏度和溶蚀速度为评价指标。
3)胶凝温度及黏度测定方法[5] 取空白凝胶液20 ml置于Brookfield旋转黏度计测试杯中，选取18号转子，设定转速100 r/min，溫控程序为4～40 ℃，升温速率0.5 ℃/min，黏度突然上升时的拐点温度即为胶凝温度，取25 ℃时的黏度为凝胶黏度。, http://www.100md.com(谢松)
关键词 poloxamer 原位凝胶 溶蚀 Box-Behnken响应面法
中图分类号：R944.1； R979.5 文献标志码：A 文章编号：1006-1533(2019)11-0061-05
Preparation of leflunomide long-term release injection
XIE Song*
(Central Research Institute， Shanghai Pharmaceuticals Holding Co.， Ltd.， Shanghai 201203， China)
ABSTRACT Objective： To prepare a long-term release subcutaneous injection based on poloxamer P407 and P188. Methods： The gelation temperature， viscosity and dissolution rate were taken as dependent variables and the Box-Behnken response surface method was used to optimize the in situ gel formulation. Results： According to the fitting results， when poloxamer P407 and P188 were used at 21.63% and 2.41%， the gelatinization temperature was at 34.99 ℃， the viscosity was 48.07 cP， and the dissolution time was 4.47 h. Combined with solid dispersion technology， the in situ gel injection has it stable release rate for 7 days， and finally obtained more than 80% accumulative release. Conclusion： The model was highly significant. The optimized formulation can meet the requirements of long-term release injection.
KEY WORDS poloxamer； in situ gel； dissolution； Box-Behnken response surface method
类风湿性关节炎(RA)属于自身免疫性疾病。是一种发病缓慢、伴随炎症的关节疾病，多发于四肢关节[1]。来氟米特是一种免疫调节剂，通常用于治疗RA，其结构为异噁唑类，通过化学合成而得。该药在国内外已上市多年，为口服固体制剂。其代谢产物特立氟胺有两个作用：一是通过抑制二氢乳清酸脱氢酶的活性从而阻断嘧啶的从头合成途径，影响DNA和RNA的合成；二是可抑制酪氨酸激酶的活性和细胞的粘附，并能抑制抗体的产生和分泌[2]。该药临床应用兼具良好的安全性和有效性。
以泊洛沙姆(poloxamer)为基质制备的原位凝胶属温度敏感型。其不同比例的溶液在感受温度变化时会产生溶胶-凝胶之间的可逆转变。又因非毒性和溶液稳定性，使其非常适合作为注射剂的载体[3]。本研究通过Box-Behnken响应面法优选满足皮下注射要求的原位凝胶配方，同时采用固体分散体技术调节释药速率从而达到小剂量来氟米特局部给药一周一次的目的。
1 材料与方法
1.1 仪器
UV-1700紫外分光光度计(岛津仪器(苏州)有限公司)；RV10旋转蒸发仪(艾卡(广州)仪器设备有限公司)；SHA-B数显恒温水浴振荡器(常州国华电气有限公司)；DV-Ⅲ旋转式黏度计(美国博勒飞公司)；CP-225D型电子天平(德国赛多利斯集团)。
1.2 试药
来氟米特(南京康满林化工实业有限公司，批号20160301)；乙基纤维素(泸州北方化学工业有限公司，批号20160403)；poloxamer P407(批号WPWJ554C)、poloxamer P188(批号WPYJ540B)均购自巴斯夫(中国)有限公司；甲醇、乙醇(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 空白凝胶配方优选
1)空白凝胶的制备 应用冷溶法[4]，按处方量量取纯化水，冷藏过夜，取处方比例P407和P188缓慢加入上述冷水中，冷藏至完全溶解，备用。
2)凝胶优选配方评价指标 鉴于项目开发目的是对患处进行局部注射并达到迅速胶凝、长效缓释的目的。故选用胶凝温度(25 ℃)、黏度和溶蚀速度为评价指标。
3)胶凝温度及黏度测定方法[5] 取空白凝胶液20 ml置于Brookfield旋转黏度计测试杯中，选取18号转子，设定转速100 r/min，溫控程序为4～40 ℃，升温速率0.5 ℃/min，黏度突然上升时的拐点温度即为胶凝温度，取25 ℃时的黏度为凝胶黏度。, http://www.100md.com(谢松)