EDTA抗凝剂简易配制法
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2010年8月1日
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【关键词】饱和;抗凝;溶解度
doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.08.269文章编号:1006-1959(2010)-08-2243-01
常用EDTA-Na2抗凝剂的浓度是15g/L,每0.4ml干燥后可抗凝5ml血液[1]。EDTA-Na2的溶解度较大,22℃时可达11.1克,其有效抗凝浓度为1~2mg/ml,通过计算得知100ul(约两滴)饱和溶液可抗凝5~10ml血液,由于EDTA-Na2的溶解度受Nac1影响不大,为防止溶血在实践中我们用500毫升生理盐水加56克EDTA-Na2配制成饱和溶液,每份标本滴加3~5滴直接使用,取得了令人满意的效果。
1.材料和方法
1.1对象:1999年~2007年潍坊市无偿献血者。
1.2试剂:ELISA试剂盒 HBsAg购自厦门新创和上海科华公司,抗-HCV购自厦门新创和上海科华公司,抗-HIV购自北京吉比艾和北京万泰公司,TP-ELISA购自北京中生和吉比艾公司,ALT活性试剂盒购自北京中生和浙江东瓯公司。
1.3仪器:TECAN全自动酶免加样器,FAME全自动酶免分析系统。
1.4方法:配制方法 将EDTA-Na2粉末直接加入到生理盐水瓶内边加边摇匀直到瓶子底部有少许晶体不能再溶解为止,静置稳定片刻后即为EDTA-Na2饱和溶液。本溶液用普通塑料滴管滴加2~3滴即可,当血液沿试管内壁下流时由于冲击作用自动与抗凝剂混合均匀勿需再人为摇匀。每人留取两份标本,一份用本法抗凝,一份非抗凝,两份标本用同一种试剂和方法检验,阳性者均做双孔复试。抗-HIV阳性标本是向同一个人的两份等量标本中加入等量抗-HIV阳性对照物制得。将得到的结果对比分析。所有操作均按试剂盒说明书和仪器操作规程严格进行。
2.结果(见表1)
表1抗凝和非抗凝标本的检验结果比较
注:各组阳性标本中均包含10例弱阳性标本。
3.讨论
3.1由(上表可看出)抗凝标本和非抗凝标本检验结果完全相符,二者之间无差异。
3.2乙二胺四乙酸盐对血细胞和血小板形态影响很小,适用于一般血液学检查,稍微过量不影响检验结果。在使用中如果抗凝效果不佳可多加一滴,冬天温度低EDTA盐饱和度减小,可适当加温或者多加1~2滴来提高抗凝效果。从理论上讲2滴饱和溶液可抗凝5~10ml血液,在实践中我们发现个别标本抗凝效果不很理想,加3-5滴可取得最佳效果,最多不能超过8滴。
3.3本方法我站一直使用多年,实际配制时可称取56克EDTA-Na2粉末装入一次性纸杯或剪开的塑料瓶中作好标记,用作好标记的自制容器量取56克稍多一点的EDTA-Na2粉末直接加到500毫升生理盐水中配制成饱和溶液,实践证明简便易行、结果准确,同样也可用于其他ELISA检验和大部分以血浆为标本的检验项目。
参考文献
[1]赵桂芝.临床检验.北京:人民卫生出版社,2001.7.
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