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编号:13694959
新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的原代分离、培养与鉴定(2)
http://www.100md.com 2014年3月5日 《医学信息》 20149
     提取成年大鼠AT-Ⅱ的操作复杂,灌肺洗肺后才能进行消化分离[11]。提取胎鼠AT-Ⅱ需要剖宫取鼠,增加取材难度和时间,且会导致大鼠死亡而增加成本。新生大鼠成本最低,取材纯度相对较高,故选用。

    AT-Ⅱ的分离可采用多种酶消化法。其中弹性蛋白酶效果最佳,但因其昂贵不易推广。胰酶经济适用,常作为消化首选[10]。胰酶和胶原酶的联合消化法也是文献报道的常用方法,合适的酶浓度和消化时间至关重要[12]。本实验采用联合消化法,效果较好。AT-Ⅱ的纯化方法很多,差速离心和免疫黏附法是高效分离和纯化AT-Ⅱ的方法, 所得细胞产量大、纯度高[13]。电镜鉴定AT-Ⅱ是目前最好的方法。电镜下可清楚观察到胞质内的特征性板层小体及粗面内质网、高尔基体等细胞器 ......
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