妇科灌肠Ⅱ号对异位子宫内膜细胞核因子κB表达的影响
NF-κB,中药,Caco-2细胞模型,子宫内膜异位症
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摘要：目的观察核因子κB在各种干预条件下在离体培养的人异位子宫内膜细胞中的表达，探讨NF-κB与子宫内膜异位症发生、发展的关系，以及中药妇科灌肠Ⅱ号治疗子宫内膜异位症的疗效机理。方法将第3~7代人子宫内膜间质细胞种植到Transwell 培养板上与Caco-2细胞共培养，并进行干预。通过RT-PCR法检测在各种干预条件下，NF-κB在EM患者内膜细胞中的mRNA表达水平。结果在各种干预条件下，NF-κB mRNA在异位子宫内膜细胞中有不同程度表达，差异有显著性(P<0.01)。结论核因子κB与子宫内膜异位症有显著关系，中药妇科灌肠Ⅱ号对子宫内膜异位症的疗效机制可能与NF-κB信号通路有关。
关键词：NF-κB；中药；Caco-2细胞模型；子宫内膜异位症
核因子κB(NF-κB)是种能够与多种细胞基因的启动子或增强子特异结合，启动基因转录和蛋白表达的蛋白质。免疫、炎症、细胞凋亡的调节、肿瘤的发生和发展等都会受其调控。目前内异症的发病机制尚不明确，越来越多的研究表明，NF-κB信号途径的活化在EM中起重要作用。很多因素能激活NF-κB信号通路，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是其中重要的一种。TNF-α是由活化的巨噬细胞或肿瘤细胞产生的细胞炎性因子，已有研究表明[1]，TNF-α在EM患者的腹腔液中明显升高，提示TNF-α与EM的发生有一定关系。同时NF-κB信号通路被激活，并呈过度表达状态，参与EM的发生、发展，说明TNF-α介导的NF-κB的活化与EM发生发展密切相关。
为探讨妇科灌肠Ⅱ号治疗子宫内膜异位症的疗效机理，本实验以NF-κB为检测指标，设空白组为对照组，TNF-α组为干预异位子宫内膜细胞、激活NF-κB通路，中药组为验证中药妇科灌肠Ⅱ号的治疗效果，TNF-α+中药组为深入研究中药治疗内异症的作用机理。通过RT-PCR法，检测在各种干预条件下NF-κB在EM患者内膜细胞中的mRNA表达。探讨EM与NF-κB的关系，并对中药妇科灌肠Ⅱ号治疗子宫内膜异位症的机理进行研究。
1资料与方法
1.1一般资料 DMEM/F12培养液(Hyclone)，胎牛血清(NQBB)，青-链霉素双抗液(Gibco)，0.25%胰蛋白酶溶液-EDTA(BIOTOPPED)，PBS磷酸盐缓冲液(索来宝)。PCR试剂：Trizol试剂、M-MLV逆转录试剂(Invitrogen)，Super Real Pre Mix(北京天根生化科技有限公司) ......
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