戊四唑(Pentylenetetrazole, PTZ)诱导斑马鱼癫痫模型的优化及评价指标
药学评价戊四唑(Pentylenetetrazole,PTZ)是γ-氨基丁酸(简称GABA)抑制
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摘要：目的探讨建立PTZ诱导斑马鱼癫痫模型的方法，优化PTZ诱导浓度及评价指标。方法在斑马鱼PTZ诱导癫痫模型中，分别对不同浓度PTZ(1.25、2.5、5、10、20、30 mM)、不同的观察指标(快速运动距离、中速运动距离、慢速运动距离、总的运动距离)进行分析。结果PTZ在10 mM浓度下快速运动距离(V>20 mm/sec)与溶剂组相比，差异显著(P<0.01)，诱导效率最佳。因此，本模型选择PTZ 10 mM作为诱导浓度，快速运动距离(V>20 mm/sec)的改变作为药效评价指标。结论斑马鱼PTZ诱导癫痫模型中， 10 mM PTZ为最佳诱导浓度，快速运动距离的改变为最佳的药效评价指标。
关键词：戊四唑；斑马鱼；癫痫；药学评价戊四唑(Pentylenetetrazole, PTZ)是γ-氨基丁酸(简称GABA)抑制剂，GABA是一种天然存在的非蛋白质氨基酸，是哺乳动物中枢神经系统中重要的抑制性神经物质[1,2]。研究表明，大剂量的PTZ可诱导癫痫发作，是哺乳动物癫痫模型中的常用诱导剂[3,4]。最近，采用PTZ诱导斑马鱼癫痫模型的成功建立，为天然药物的药学评价和药物筛选创造了更为有力的条件[5,6]。但斑马鱼癫痫模型的优化及评价指标存在很多的争议[5]。 本实验探讨建立PTZ诱导斑马鱼癫痫模型的方法，优化PTZ诱导浓度及药学评价指标，为高通量的天然药物筛选提供更为有力的实验证据。
1资料与方法
1.1一般资料斑马鱼胚胎的繁殖以自然成对交配的方式进行。每次交配准备4~5对成年斑马鱼，平均每对能产200~300个胚胎。在受精后6h(即6 hpf)和24 hpf 对胚胎进行清理(移除已死亡胚胎)，并根据胚胎的发育阶段挑选合适的胚胎。解剖显微镜(SMZ645，Nikon公司)；48/96孔板(Nest Biotech)；行为分析仪(V3，ViewPoint Life Sciences公司)；二甲基亚砜(DMSO，阿拉丁，批号1095515)；戊四唑(Pentylenetetrazole，PTZ)购自美国sigma公司，批号069K1245。
1.2方法在 28 ℃ 条件下用养鱼用水孵育胚胎(养鱼用水水质：每1L反渗透水中加入200 mg速溶海盐 ......
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