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编号:13677564
人为操作因素对酶联免疫吸附法检测乙肝病毒血清标志物影响的探讨
http://www.100md.com 2014年6月11日 黄宗华 卢俊篙 李小松 曾孔优 陈发明
假阳性,抗-HBc,抗-HBe,酶联免疫吸附试验
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    参见附件。

     摘要:目的 ELISA技术在临床实验室的应用日渐广泛,成为快速诊断和确诊临床疾病的一项免疫诊断技术。但是,到目前为止国家相关部门尚未出台相应的实验条件要求、人员培训以及标准的操作流程,同时该技术实验操作和结果判断等环节较多,对临床结果影响较大,鉴于此,我们就目前临床实验中需要关注的地方进行阐述,以便更好地改进规范性实验技术步骤,有效减少临床检验的误诊。方法 用试剂盒中抗-HBc,抗-HBe阴性对照标本按照操作说明书加样后,分别于0,5,10,15,20,30min后加入酶标记物。结果 不同加酶时间可出现程度不同的假阳性,间隔时间越长,标本的假阳性越多。结论 不同加酶时间可出现程度不等的抗-HBc,抗-HBe抗体假阳性。为避免这种假阳性结果导致的差错,建议严格按照试剂盒说明书进行操作。

    关键词:假阳性;抗-HBc,抗-HBe;酶联免疫吸附试验

    乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物的5项指标检测方法较多,但是目前临床应用最多的还是酶联免疫吸附试验(ELISA),其中抗-HBc,抗-HBe采用竞争抑制法。

    1 资料与方法

    1.1试剂与材料

    1.1.1质控品 购于贵州省临检中心质控品:20130111W,20130108W。

    1.1.2试剂 均由珠海丽珠试剂股份有限公司提供。

    1.1.3仪器 北京天石SM-3酶标仪;北京天石ZMX 988 B洗板机;上海医疗器械七厂HH.W21.Cu600型水浴箱。

    1.1.4样本 血液样本来自本单位住院、门诊患者,真空抽血5ml,分离血清待检,共235份;用试剂盒中抗-HBc,抗-HBe阴性对照标本。

    1.2操作方法

    1.2.1.1将235份血清用生理盐水按1:30稀释,加入标本后立即加入酶结合物(使标本于酶结合物同步加入),37℃水浴30min,洗板,加入显色剂,加入终止液,酶标仪比色,213份为阴性(标本A450nm>2 ......

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