丝素蛋白/钙磷复合基因支架的制备及表征(1)
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摘要：目的 人工合成的骨替代材料在治疗部分类型的骨缺损时往往存在疗效的不确定性，特别是在大范围的骨缺损的修复中存在较高的失败率，因此需迫切寻找新的解决途径。丝素蛋白是从蚕丝中提取的天然高分子纤维蛋白，具有良好的生物学性能，本研究拟改善丝素蛋白的骨诱导性能。方法 采用共沉积法制备了丝素蛋白/钙磷复合材料，制备腺病毒Ad-BMP-2，然后制备丝素蛋白/钙磷复合基因支架。将骨间充质细胞培养于其上，并采用扫描电镜(SEM)观察细胞的贴附，及检测细胞增殖、分化的性能进行观察。结果 SEM观察显示生物材料具有良好的孔径；制备了Ad-BMP2腺病毒，病毒表达GFP绿色荧光蛋白；细胞学检测发现该生物支架生物相容性好，细胞呈梭形，舒展充分，细胞核处隆起，细胞周围可见基质附着。结论 该生物材料具有良好的孔径及生物相容性，具有良好的应用前景。
关键词：丝素蛋白；钙磷复合材料；BMP-2；腺病毒
生物医学组织工程是近年来继基因工程之后取得重大技术突破的生命科学领域新的研究热点。组织工程的三大要素是：具有增殖分化潜能的种子细胞、生物支架材料、生长因子。组织工程核心技术在于构建细胞与生物材料复合物。细胞外基质是构建组织工程化牙周组织的物质基础，细胞在三维支架材料中不断生长、增殖，并分泌细胞外基质取代逐渐降解的生物材料，最终形成具有活力的组织。本研究将丝素蛋白与磷酸钙粉末混合，可使无机粉末均匀分布于丝素蛋白中，避免了无机粉末由于静电作用互相聚集的倾向，利用仿生共沉积的方法获得丝素蛋白磷酸钙复合物，并结合BMP-2腺病毒，制备出丝素蛋白/钙磷复合基因支架。
1 资料与方法
1.1丝素蛋白的制备 丝素蛋白的制备：①家蚕生丝脱胶 家蚕生丝置于约0.5‰的无水碳酸钠溶液中，于90℃～100℃处理30min，重复3次，以脱去蚕丝中的丝胶。脱胶后洗净，烘箱60℃烘干后得到精炼蚕丝；②丝素纤维溶解：配置CaCl2·CH3CH2OH·H2O(摩尔比1：2：8)三元溶液 ......
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