半枝莲多糖对胶质瘤细胞增殖抑制作用和Bcl—2蛋白表达的影响
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摘要：目的 研究半枝莲多糖对胶质瘤细胞增值抑制作用，观察对Bcl-2蛋白表达的影响。方法 常规培养人胶质瘤 U251 细胞，分别用12.5、25、50、100 μg/mL半枝莲多糖作用于U251细胞；四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT 法)检测U251细胞增殖抑制率；Western blot检测Bcl-2蛋白表达水平。结果 半枝莲多糖抑制人胶质瘤细胞U251的增殖，抑制作用呈剂量和时间依赖性；随着半枝莲多糖浓度的增加，U251中Bcl-2蛋白表达水平呈减少趋势。结论 半枝莲多糖可能通过下调Bcl-2蛋白表达，抑制胶质瘤细胞体外生长。
关键词：半枝莲多糖；神经胶质瘤；细胞增殖；Bcl-2蛋白
半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)为唇形科黄岑属植物，其中SBPS是从半枝莲中分离的主要功能性成分之一。研究证明半枝莲多糖具有免疫调节、抗肿瘤、增效减毒、抗氧化、抗衰老等生物活性[1]。宋高臣等[2]通过SP免疫组织化学染色技术测定HepA瘤细胞中Rb、P16基因蛋白的表达量，实验表明半枝莲多糖对HepA瘤细胞增殖的抑制作用可能通过上调抑癌基因Rb、P16的蛋白表达而达到。本研究旨在讨论半枝莲多糖是否对胶质瘤细胞有增长抑制作用，并观察对Bcl-2蛋白的表达是否有影响，为半枝莲多糖的抗胶质瘤作用机制寻找切入点打下基础。
1资料与方法
1.1一般资料 细胞系胶质瘤细胞株 U251 来自中科院上海细胞所，半枝莲多糖购于宁波德康生物制品有限公司；二甲基亚砜(DMSO)、胰蛋白酶为美国Amresco公司产品；苯甲基硫酰氟(PMSF)为美国Promega公司产品；RPMI-1640 培养基、噻唑蓝(MTT)、乙二胺四乙酸(EDTA)、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)为美国GIBCO公司产品、小鼠抗Bcl-2单克隆抗体为Santa Cruz 公司产品。
1.2方法
1.2.1细胞培养及药物配置 常规培养胶质瘤U251细胞 ......
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