同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞中PTEN甲基化的影响(1)

http://www.100md.com 2014年8月27日 徐弋 曹成建 赵丽 徐华 韩学波 杨晓玲 田珏 姜怡邓

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     摘要：目的 探讨同型半胱氨酸(homocysteine， Hcy)磷酸酶与张力蛋白同源缺失性基因 (phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten， PTEN)启动子区DNA甲基化的影响。方法 原代培养血管平滑肌细胞(VSMCs)，100 M Hcy刺激48h后，以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PTEN mRNA 表达水平的变化，western blot检测PTEN蛋白表达变化；生物信息学分析PTEN启动子区CpG岛，巢式降落时甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测PTEN DNA甲基化水平。结果 与正常对照组相比(0 M Hcy)，给予100 M Hcy刺激后，VSMCs中PTEN mRNA 及蛋白表达水平均降低；其启动子区存在数个CpG岛，其DNA甲基化水平升高。结论 Hcy可下调VSMCs中PTEN的表达，而PTEN DNA启动子区的高甲基化可能在这一过程中起到关键调控作用。

    关键词：同型半胱氨酸；PTEN；DNA甲基化；血管平滑肌细胞；动脉粥样硬化

    血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells， VSMCs)的活化、增殖等改变是动脉粥样硬化(Atherosclerosis， AS)形成的中心环节。同型半胱氨酸(Homocysteine，Hcy)是AS的独立危险因子[1]，可以促进VSMCs的增殖[2] ......

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