采用彗星实验检测32P敷贴对幼鼠骨髓细胞DNA的损伤
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摘要：目的 通过检测32P敷贴对幼鼠骨髓细胞DNA损伤，从而探讨32P体表局部敷贴对幼鼠的全身毒性效应。方法 采用彗星实验检测SD大鼠幼鼠骨髓细胞DNA水平的损伤。结论 32P体表局部敷贴照射治疗能引起SD幼鼠骨髓细胞DNA损伤，因此，婴幼儿临床中应慎用32P体表局部敷贴照射治疗，尤其应避免大剂量、长时间使用。
关键词：婴幼儿；32P敷贴；DNA损伤
32P敷贴治疗时一种广义的短距离放射性治疗方式[1]。目前被广泛地应用于婴幼儿等幼龄群体，关于其安全性的报道只是基于临床经验性的总结，研究指标不合理，设计不科学，因而其安全性一直存在争议。本研究采用彗星实验检测SD大鼠幼鼠骨髓细胞DNA水平的损伤，从而探讨32P体表局部敷贴照射治疗对幼年动物全身毒性作用，进而评价32P敷贴应用于婴幼儿患者的安全性。
1 资料与方法
1.1实验动物 清洁级SD (Sprague-Dawley)大鼠，从江西中医学院动物科学实验部购买[许可证编号：SCXK(赣)2005-0001]。选取幼鼠日龄为4～6d，同一批实验选用同一日动物。
1.2主要试剂 正常熔点琼脂糖；低熔点琼脂糖；N-十二烷基肌氨酸钠；聚乙二醇辛基苯基醚；乙二胺四乙酸二钠；Hanks' 平衡盐溶液 (无Ca2+，Mg2+)；三(羟甲基)胺基甲烷；碘化丙啶染料；氯化钠；氯化钾；磷酸氢二钠；磷酸二氢钾；氢氧化钠；二甲基亚砜和盐酸等；32P敷贴器；吸水滤纸片；32P同位素溶液。
1.3主要器材 美国丹佛精密分析天平；细胞过滤筛(200目)；日本Olympus像差倒置显微镜；细胞计数板；上海博迅高精度恒温水浴箱；琼脂糖水平电泳槽；像差倒置荧光显微镜；像差倒置荧光显微镜摄像系统。
1.4操作方法
1.4.1 32P体表局部敷贴贴敷SD大鼠幼鼠的动物模型的建立 选用48只6d体重相近的SD大鼠幼鼠，随机分为4组，分别命名为对照组、低剂量组、中剂量组以及高剂量组，每组12只，模拟临床敷贴方法，将32P滤纸片敷贴，贴于SD大鼠幼鼠背部皮肤，并用胶带固定。对照组、低剂量组、中剂量组以及高剂量组分别采用活度为0μCi、5μCi 、25μCi 、125μCi的敷贴 ......
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