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编号:13653694
负载RPL8蛋白DC的制备及鉴定(1)
http://www.100md.com 2015年1月15日 《医学信息》 20152
     摘要:目的 制备RPL8蛋白冲击的树突状细胞。方法 构建重组原核表达载体pET28a(+)-RPL8,IPTG诱导RPL8融合蛋白表达,RPL8蛋白纯化后用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定;分离小鼠骨髓细胞,经 rmGM-CSF、rmIL-4体外诱导培养DC,流式细胞仪检测DC表面标志;RPL8蛋白致敏DC后,采用荧光标记抗体荧光显微镜下观察细胞RPL8负载情况。结果 经双酶切及PCR鉴定可见大小约774bp的条带,纯化蛋白经Western blot分析见28kD大小的特异性条带;体外培养的DC具有典型的树突状结构,流式细胞仪检测细胞高表达CD11C、CD80、MHC-Ⅰ类、MHC-Ⅱ类分子,RPL8蛋白致敏DC后,DC见绿色荧光。结论 成功制备RPL8蛋白冲击的DC疫苗,为进一步黑色素瘤免疫治疗研究提供基础。

    关键词: RPL8;树突状细胞;黑色素瘤

    树突状细胞(dendritic cell ......
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