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编号:12871557
HDAC6在ISO诱导大鼠心肌纤维化中的作用研究(2)
http://www.100md.com 2016年5月28日 《医学信息》 2016年第21期
     1.2.3心脏质量指数的测定:①末次给药后只饮水24h,称重;②腹腔麻醉后,剖胸取血,备用,取心脏;③洗净、吸干后,称全心重量,剥离左心室,称重,计算心重指数和左心室重指数。

    1.2.4 HE和Masson染色以及心肌CVF计算:将切片经烤热后于二甲苯和梯度乙醇溶液中脱蜡至水。更换溶液,再重复上述步骤;苏木精染5min,流水冲洗;1%盐酸乙醇快速分化,流水稍洗,促蓝液返蓝数秒,流水冲洗;然后依次行HE染色和Masson染色。固定切片,光学显微镜下观察、摄片。在每张Masson染色切片中,挑取出3个非血管视野(×400),使用图像扫描软件Image Proplus6.0进行扫描分析;计算CVF(%):胶原面积/总视野面积×100%。

    1.2.5 I型及III型胶原含量的检测:血标本取出后,提取血清;依照ELISA试剂盒操作指南进行:包被、加样、加酶标抗体、加底物液显色、终止反应、结果判定。分析并酶标仪测定I型III型胶原的含量,绘制标准曲线,计算胶原蛋白含量

    1.2.6 HDAC6和α-SMA蛋白表达测定:①心肌总蛋白的提取:取出0.1g心肌组织块,均浆机充分打散并研磨成均匀糊状,置入离心管中;给予RIPA容液1毫升 ......
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