热性惊厥患儿人类疱疹病毒6型感染的检测分析(1)
摘要：目的 了解热性惊厥患儿人类疱疹病毒6型(HHV-6)的感染情况。方法 采集患儿血清及脑脊液样本，采用间接免疫荧光法检测样本中的HHV-6 IgM、IgG抗体，采用巢氏PCR法检测样本中的HHV-6 DNA。结果 热性惊厥患儿血清HHV-6 IgM阳性率为17.00%(9/53)，IgG阳性率为66.00%(35/53)；脑脊液HHV-6 IgM和IgG均未检出阳性。血清样本中，HHV-6 DNA扩增阳性率为18.90%(10/53)，其中有7例IgM为阳性，95份脑脊液样本均未扩增出HHV-6 DNA。结论 热性惊厥和HHV-6感染可能有相关性，但本研究仅在部分热性惊厥患儿血清中查出HHV-6 IgM或HHV-6 DNA，脑脊液样本均未查出HHV-6 IgM或HHV-6 DNA，因此本研究未能证实HHV-6的噬神经特点，有待加大样本量进一步深入研究。
关键词：儿童；热性惊厥；疱疹病毒6型
Abstract：Objective To investigate the effects of febrile seizures in children with human herpes simplex virus type 6(HHV-6)infection.Methods Serum and CSF samples were collected and detected by indirect immunofluorescence assay in samples of HHV-6 IgM，IgG antibody，using nested PCR method to detect the samples of HHV-6 DNA.Results the positive rate of serum HHV-6 in children with febrile convulsion(9/53)of IgM was 17.00%， IgG positive rate was 66.00%(35/53)；Cerebrospinal fluid HHV-6 IgM and IgG were not detected positive.The positive rate of HHV-6 DNA amplification was 18.90%(10/53)in serum samples.Among them，IgM was positive in 7 cases and HHV-6 DNA was not amplified in 95 cerebrospinal fluid samples.Conclusion Febrile convulsion and HHV-6 infection may have a correlation，but only part of this study in the serum of children with febrile convulsion was found in HHV-6 IgM or HHV-6 DNA，cerebrospinal fluid samples were not found in HHV-6 IgM or HHV-6 DNA，so this study failed to confirm the neuronophagia characteristics of HHV-6，to add a large sample of further research.
, 百拇医药
Key words：Children；Febrile convulsion；Herpesvirus 6
1986年Sslahuddin等發现了一种具有疱疹病毒形态和嗜淋巴细胞的新病毒，最初认为该病毒只感染新鲜分离的B淋巴细胞，曾被命名为人嗜B淋巴细胞病毒，后来人们发现它与疱疹病毒科中的其它病毒抗原性和酶切图谱不同，故更名为人疱疹病毒6型(Human herpesvirus-6， HHV-6)，此后世界各地又陆续分离出一些毒株，进一步研究发现HHV-6分为两个亚型，即A组(GS株)和B组(Z29株)[1]。HHV-6属于人类疱疹病毒 亚族，这一亚族病毒的细胞感染范围广，致病性尚未完全了解，其感染与临床上许多疾病有关，如幼儿急疹、慢性疲劳综合征等[2]，有研究表明，部分3岁以内患儿伴发热的严重惊厥或拟似脑炎与HHV-6感染相关[3]。本研究通过了解热性惊厥患儿HHV-6感染情况，探讨患儿热性惊厥与HHV-6感染的关系。
1资料与方法
, 百拇医药
1.1一般资料 2010年9月～2015年3月在新疆维吾尔自治区人民医院儿科就诊的高热惊厥儿童共95例，其中脑脊液和血清标本都有的53例，其它42例仅有脑脊液(未收集到血清)，其中男童48例，女童47例；维吾尔族52例，汉族26例，回族8例，哈萨克族9例。纳入标准：年龄为新生儿～14岁，有高热惊厥症状；排除标准：被诊断为结核性脑炎、细菌性脑炎及非感染性脑炎患儿。
1.2方法
1.2.1标本的采集 在发热3 d内采集患儿静脉血3 ml，枸橼酸钠无菌抗凝，分离血清，4℃保存备用；脑脊液标本的收集：留取2 ml以上脑脊液放入无菌试管中，4℃保存备用。
1.2.2实验室检测 采用间接免疫荧光法检测患儿血清及脑脊液中HHV-6 IgM、IgG抗体，间接免疫荧光法检测试剂盒购自欧盟医学诊断(中国)有限公司，将血清或脑脊液用吸附剂按1：10稀释，混匀后，点于载玻片上，37 ℃温育90 min，用PBS洗3次，加入含有伊文斯蓝的荧光素标记抗人IgM或IgG FITC结合物，37℃孵育30 min，用PBS洗3次，用蒸馏水脱去盐分1次。风干后封片，在荧光显微镜下读片，放大倍数400倍，荧光显微镜下细胞膜、胞浆或细胞核可见绿色荧光判为阳性，试剂盒提供阳性及阴性对照做质控。血清和脑脊液的IgM、IgG均按照1：10滴度进行检测。, 百拇医药(孙岩 王锋 于静 马兰红 古丽比亚 余亮 罗新辉 孙荷)
关键词：儿童；热性惊厥；疱疹病毒6型
Abstract：Objective To investigate the effects of febrile seizures in children with human herpes simplex virus type 6(HHV-6)infection.Methods Serum and CSF samples were collected and detected by indirect immunofluorescence assay in samples of HHV-6 IgM，IgG antibody，using nested PCR method to detect the samples of HHV-6 DNA.Results the positive rate of serum HHV-6 in children with febrile convulsion(9/53)of IgM was 17.00%， IgG positive rate was 66.00%(35/53)；Cerebrospinal fluid HHV-6 IgM and IgG were not detected positive.The positive rate of HHV-6 DNA amplification was 18.90%(10/53)in serum samples.Among them，IgM was positive in 7 cases and HHV-6 DNA was not amplified in 95 cerebrospinal fluid samples.Conclusion Febrile convulsion and HHV-6 infection may have a correlation，but only part of this study in the serum of children with febrile convulsion was found in HHV-6 IgM or HHV-6 DNA，cerebrospinal fluid samples were not found in HHV-6 IgM or HHV-6 DNA，so this study failed to confirm the neuronophagia characteristics of HHV-6，to add a large sample of further research.
, 百拇医药
Key words：Children；Febrile convulsion；Herpesvirus 6
1986年Sslahuddin等發现了一种具有疱疹病毒形态和嗜淋巴细胞的新病毒，最初认为该病毒只感染新鲜分离的B淋巴细胞，曾被命名为人嗜B淋巴细胞病毒，后来人们发现它与疱疹病毒科中的其它病毒抗原性和酶切图谱不同，故更名为人疱疹病毒6型(Human herpesvirus-6， HHV-6)，此后世界各地又陆续分离出一些毒株，进一步研究发现HHV-6分为两个亚型，即A组(GS株)和B组(Z29株)[1]。HHV-6属于人类疱疹病毒 亚族，这一亚族病毒的细胞感染范围广，致病性尚未完全了解，其感染与临床上许多疾病有关，如幼儿急疹、慢性疲劳综合征等[2]，有研究表明，部分3岁以内患儿伴发热的严重惊厥或拟似脑炎与HHV-6感染相关[3]。本研究通过了解热性惊厥患儿HHV-6感染情况，探讨患儿热性惊厥与HHV-6感染的关系。
1资料与方法
, 百拇医药
1.1一般资料 2010年9月～2015年3月在新疆维吾尔自治区人民医院儿科就诊的高热惊厥儿童共95例，其中脑脊液和血清标本都有的53例，其它42例仅有脑脊液(未收集到血清)，其中男童48例，女童47例；维吾尔族52例，汉族26例，回族8例，哈萨克族9例。纳入标准：年龄为新生儿～14岁，有高热惊厥症状；排除标准：被诊断为结核性脑炎、细菌性脑炎及非感染性脑炎患儿。
1.2方法
1.2.1标本的采集 在发热3 d内采集患儿静脉血3 ml，枸橼酸钠无菌抗凝，分离血清，4℃保存备用；脑脊液标本的收集：留取2 ml以上脑脊液放入无菌试管中，4℃保存备用。
1.2.2实验室检测 采用间接免疫荧光法检测患儿血清及脑脊液中HHV-6 IgM、IgG抗体，间接免疫荧光法检测试剂盒购自欧盟医学诊断(中国)有限公司，将血清或脑脊液用吸附剂按1：10稀释，混匀后，点于载玻片上，37 ℃温育90 min，用PBS洗3次，加入含有伊文斯蓝的荧光素标记抗人IgM或IgG FITC结合物，37℃孵育30 min，用PBS洗3次，用蒸馏水脱去盐分1次。风干后封片，在荧光显微镜下读片，放大倍数400倍，荧光显微镜下细胞膜、胞浆或细胞核可见绿色荧光判为阳性，试剂盒提供阳性及阴性对照做质控。血清和脑脊液的IgM、IgG均按照1：10滴度进行检测。, 百拇医药(孙岩 王锋 于静 马兰红 古丽比亚 余亮 罗新辉 孙荷)
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