牙髓干细胞的研究进展(2)
3.2多向分化能力 牙髓干细胞在不同因子诱导下可分化为中胚层细胞(成骨细胞、成牙本质细胞等)、外胚层细胞(角膜上皮细胞、神经细胞等)，具体分析如下：①向成骨细胞分化：史欣[21]等以矿化液培养DPSCs为观察组、在此基础上加入适量浓度OPN为对照组，均行茜素红染色法，测定矿化结节的形成，分析骨源性基因(BSP、Runx-2、OCN、Col-1等)表达情况。结果得出，茜素红染色法发现诱导培养28 d后，观察组出现的矿化结节数量、大小均较对照组高(P<0.05)。并且在OPN诱导培养7 d后，两组DPSCs骨源性基因表达呈阳性，同时OPN組的骨源性基因(BSP、Runx-2、Col-1、OCN等)表达水平较对照组高(P<0.05)，说明骨桥蛋白可以促进矿化液诱导DPSCs成骨分化能力的增强；②向成牙本质细胞分化：孙佳琦[22]等以体外培养人牙髓干细胞，分别和硅化胶原、胶原材料进行复合，建立细胞-支架复合体，加以矿化诱导液、常规培养液培养，分析培养48 h、14 d、3周时在两种胶原支架材料中人牙髓干细胞的生长，同时使用半定量PCR、实时定量PCR法分析两种材料中DSPP、DMP-1、OCNmRNA表达水平。结果显示，人牙髓干细胞在硅化胶原支架材料上的生长情况类似于胶原材料，并且经过硅化处理胶原支架材料，便于提高牙本质再生相关基因(OCN、DSPP、DMP-1等)的表达水平，体现出胶原支架材料经过硅化处理，利于人牙髓干细胞向成牙本质细胞分化；③向脂肪细胞分化：Lee[23-24]等人研究指出，病毒转染的肽基脯氨酰基顺反异构酶PINI对DPSCs向脂肪细胞分化起到促进作用，结果显示，随着脂滴的增多，成脂分化相关基因(过氧化物酶增生激活受体、脂肪酶和脂肪酸结合蛋白基因)表达水平也随之增强，两者呈正相关；④向神经细胞分化：李双月[25]等人以大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)为研究对象，采用全骨髓贴壁法对其进行分离、培养、鉴定，观察其细胞形态、生长增殖情况；以流式鉴定细胞表面标志物；对第3代细胞提供RA、bF-GF、EGF联合诱导，加以细胞免疫化学染色测定神经细胞标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达。结果显示，体外培养BMSCs呈成纤维细胞样， 经诱导后分化为神经细胞，可以明显表达神经细胞标志NSE，说明BMSCs在诱导下可分化为神经细胞，便于为日后移植治疗神经系统损伤提供依据。
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4 总结
经过上述内容分析，牙髓干细胞具有良好的分化潜能、自我更新能力、高度增殖能力等生物活性。此外，牙髓干细胞还具备良好的牙髓、牙本质再生能力，所以，牙髓干细胞可以作为组织工程学中极具潜力的种子细胞。可见，牙髓干细胞在组织生物学、再生医学等方面取得了明显的进步，应用前景十分广阔。但是牙髓干细胞仍然面临诸多问题，如牙髓干细胞的高效率定向分化存在一定程度的困难；牙髓干细胞尚无特异性细胞表面标志物；牙髓干细胞存在形成肿瘤的风险；牙髓干细胞随着年龄的增长，其组织修复能力降低；牙髓干细胞相关研究多数为人体外实验/动物实验，需要进一步研究牙髓干细胞在疾病治疗方面的影响等。相信随着当前临床实践研究的不断深入，牙髓干细胞在今后组织工程领域得以发挥重大作用。
参考文献：
[1]王亦菁，张晓东，于华，等.体外成牙环境对牙髓干细胞和外胚间充质干细胞分化的影响[J].华西口腔医学杂志，2012，30(6)：579-583.
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[2]王艳梅，木合塔尔·霍加，庄友梅，等.TGF-β3与牙髓干细胞联合应用对兔面神经损伤修复的作用[J].国际生物医学工程杂志，2012，35(3)：160-164，3-4.
[3]庄友梅，木合塔尔·霍加，许辉，等.转化生长因子-β3和牙髓干细胞在兔面神经损伤修复中作用[J].中华实用诊断与治疗杂志，2015，29(7)：637-639.
[4]董海波，李艳萍，牛玉梅，等.模拟微重力对人牙髓干细胞微丝及细胞迁移能力的影响[J].口腔医学研究，2012，28(7)：673-675.
[5]张红梅，王永刚，张晓梅，等.脱矿牙本质基质对人牙髓干细胞体外增殖、牙向分化能力的影响[J].口腔医学，2012，32(3)：143-147.
[6]王晓航， 巴景斌.两种乳牙根管填充剂的临床疗效比较[J]. 蚌埠医学院学报， 2015， 40(4)：488-489.
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[7]张晓莉.TGF-β3和牙髓干细胞修复损伤面神经效果的检测[D].新疆医科大学，2013.
[8]胡资兵，曾荣，魏波，等.牙髓干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的实验研究[J].中国脊柱脊髓杂志，2014，24(9)：839-846.
[9]Gronthos S，Mankani M，Brahim J，et al.Postnatal human dental pulp stem cells(DPSCs)in vitro and in vivo[J].Proc Natl Acad Sci USA，2000，97(25)：13625-13630.
[10]Liu H，Li W，Shi S，et al.MEPE is downregulated as dental pulp stem cells differentiate[J].Arch Oral Biol，2005，50(11)：923-928.
[11]刘少华，魏奉才，孙善珍，等.牙髓培养细胞特性与牙髓干细胞定位[J].上海口腔医学，2004，13(2)：106-109.
[12]郭俊，贺露，杨健.犬牙髓干细胞的分离培养与鉴定[J].实用口腔医学杂志，2016，32(1)：99-103.
[13]王钰莹，运慧媛，缪宏颖，等.成骨细胞与矿化液诱导牙髓干细胞向成骨细胞分化的对比研究[J].中华口腔医学杂志，2012，47(6)：364-368., 百拇医药(赵越)
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4 总结
经过上述内容分析，牙髓干细胞具有良好的分化潜能、自我更新能力、高度增殖能力等生物活性。此外，牙髓干细胞还具备良好的牙髓、牙本质再生能力，所以，牙髓干细胞可以作为组织工程学中极具潜力的种子细胞。可见，牙髓干细胞在组织生物学、再生医学等方面取得了明显的进步，应用前景十分广阔。但是牙髓干细胞仍然面临诸多问题，如牙髓干细胞的高效率定向分化存在一定程度的困难；牙髓干细胞尚无特异性细胞表面标志物；牙髓干细胞存在形成肿瘤的风险；牙髓干细胞随着年龄的增长，其组织修复能力降低；牙髓干细胞相关研究多数为人体外实验/动物实验，需要进一步研究牙髓干细胞在疾病治疗方面的影响等。相信随着当前临床实践研究的不断深入，牙髓干细胞在今后组织工程领域得以发挥重大作用。
参考文献：
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