miR-187在宫颈癌中的表达与临床病理关系的研究(2)
1资料与方法1.1一般资料 收集2014年1月~2016年12月在湖南省妇幼保健院做宫颈癌根治术或宫颈锥切术的宫颈癌组织标本78例,收取同期非宫颈癌手术(子宫肌瘤、子宫脱垂手术等患者)的正常宫颈组织手术标本60例。所有正常宫颈组织标本均经过严格组织病理检查无其它相关病变;所有宫颈癌患者术前均经病理活检证实癌变,且术前均未接受任何放化疗。所有患者临床资料完整,同时均未合并其他肿瘤或者癌前病变。所有标本收集后立刻速冻放入-80 ℃保存。
1.2 RNA的提取及逆转录 用Trizol法参照TRIzol Reagent试剂说明书提取总RNA,并用琼脂糖凝胶电泳法检测RNA的完整性。用TaKaRa逆转录试剂盒按说明书进行RNA的逆转录。
1.3实时荧光定量 PCR所有引物合成均购自上海生工,序列如下:miR-187,forward 5′-ACACTCCAGCTGGGGGCCGACGTTGTGTT-3′ and reverse 5′-TGGTGTCGTGGAGTCG-3′;内参U6 ......
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