1.2方法 两组均采用免疫组化法[6]检测CD44v4的表达情况。石蜡切片常规脱蜡水化后，用磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution，PBS)冲洗，3次×3 min，然后进行组织修复。每张切片加1滴或50 μl的3%H2O2，室温下孵育10 min，以阻断内源性过氧化物酶的活性，PBS冲洗，3次×3 min。除去PBS液，每张切片加1滴或50 μl的一抗(CD44v4)，4℃过夜，PBS冲洗，3次×5 min。除去PBS液，每张切片加1滴或50 μl放大剂(试剂A)，室温下孵育10 min，PBS冲洗，3次×3 min。除去PBS液，每张切片加1滴或50 μl多聚酶结合物(试剂B)，室温下孵育10 min，PBS冲洗，3次×3 min。除去PBS液，每张切片加1滴或50 μl新鲜配制的DAB溶液，显微镜下观察3～5 min。自来水冲洗，苏木素复染，用0.1% HCl分化，自来水冲洗，PBS返蓝。DAB显色 ......