双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测血浆ＨＳＰ70的建立及初步应用
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摘要：[目的]建立双抗体夹心法检测血浆中热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)水平。[方法]制备兔抗HSP70抗体，建立双抗体夹心法标准曲线，鉴定其最小检出限、精确度、回收率，并初步应用于检测40例男性健康成了血浆样本的HSP70水平。[结果]双抗夹心ELISA法检测HSP70的最小检测限为10ng/ml，标准曲线在10～100ng/ml范围内线性良好。3份同批血清标本分别重复8次8测定，平均批内变异系数为7.6%；3份不同批血清分别重复6次测定，平均批间变异系数为12.7%。血清中加入已知量的标准抗原，测得回收率为85.5%。对40例男性健康成人(20.0±0.9)岁血浆样本检测，其HSP70浓度均值为(151.0±13.8)ng/ml。[结论]本方法检测HSP70的可例范围广，灵敏度和精密度较高，变异系数较小，表明其灵敏、特异、可靠。
关键词：热休克蛋白70；血浆；酶联免疫吸附实验
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