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编号:11433627
氟对人胚肝细胞P53表达的影响(1)
http://www.100md.com 2007年2月1日 褚启龙 哈建利 夏 涛等
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    参见附件(1234KB,3页)。

     摘要: [目的] 探讨氟对人胚肝细胞(L-02细胞)P53表达的影响。 [方法] 对体外培养的人胚肝细胞染毒氟化钠40、80、160 μg/ml 24 h后,分别采用MTT试验、蛋白印迹技术(Western blot)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测人胚肝细胞存活率、P53蛋白和mRNA水平。 [结果] 高浓度氟组细胞存活率显著低于对照组(P0.05);各氟染毒组P53mRNA的表达量均显著高于对照组(P260和D280的值,其D260/D280在1.8~2.0之间为合格。余下的RNA溶液于-70 ℃保存备用。

    1.3 MTT试验

    为了检测不同浓度NaF对培养细胞存活的影响,将一长满培养瓶的培养细胞用0.25%胰蛋白酶消化后,再将细胞接种于96孔培养板中培养20 h。按上述NaF染毒的方法分为4组,每组5个孔。同时另取无细胞的5个孔,每孔加入含10%胎牛血清的DMEM培养液200 μl作为空白对照。经24 h培养后,每孔加入20 μl 5 mg/ml 的MTT溶液 ......

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