1.2.4ELISA法检测DAO和D-Lac水平分别取各组大鼠全血离心制成血浆，按每孔100ul分别加标准品或待测样本，37℃温育，依次加生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液、底物溶液、终止溶液，终止反应后5min内用酶标仪在450nm波长依次测量各孔OD值，分别对照DAO和D-Lac标准品进行统计分析。

    1.2.5WesternBlot法检测小肠HMGB1水平分别取小肠标本制成检测标本，在样品中等体积2×上样缓冲液，按每孔100 ug蛋白上样液。配10% SDS聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，转印，恒流转膜，5% 脱脂牛奶封闭，室温，摇床上摇2 h，加β-actin一抗，1：1000，4℃，过夜；TBST漂洗，加入HRP标记通用型二抗(goat来源)，孵育1 h，TBST漂洗，成像。扫描条带，并用Image J进行分析。

    1.2.6Q-PCR检测小肠mRNA水平采用Trizol法分别提取小肠组织的总RNA，逆转录获得cDNA，Q-PCR仪扩增(按说明书操作)。大鼠HMGB1上游引物5’-TTCTTCTTGTTCTGTTCTGAG-3’ ......