2.1.3 免疫印迹法检测 使用细胞膜蛋白抽提试剂盒提取膜蛋白，以4℃，14000转离心5 min，收集上清即为细胞膜蛋白溶液。用酶标仪在562 nm处测定标准品液和各组细胞膜蛋白液的吸光值，并做好记录。对照本实验的蛋白分子量制作分离胶与浓缩胶，按预定上样顺序各样本各20 μL加入泳道，并将上样顺序记录。设置电泳条件，开始电压强度为80 V，电泳时间为30 min，电泳至整个条带进入分离胶后，将电压增加到120 V，稳压继续电泳，待预染蛋白质Marker条带分离清晰时停止电泳。电泳结束后低温转膜2 h。取下转好的PVDF膜，使用一步法快速WB(HRP)试剂盒说明进行操作。将各组PVDF膜放入蛋白膜印迹再生液中再生，并按说明进行内参处理。每个目的蛋白条带及内参条带做3次，曝光后得照片用扫描仪扫描，经Gelpro32 图像软件分析读取灰度值，应用相应软件进行处理，比较各组目的蛋白的表达情况。

    2.1.4 统计学分析 统计学处理用SPSS 19.0软件完成，实验数据以平均值±标准差(x±s)为表示方式，采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义，本文柱状图使用专业制图软件：GraphPad Prism软件制作 ......