山慈菇含药血清对人乳腺癌SK-BR-3细胞增殖、凋亡以及迁移能力影响的实验研究(2)
药物制备:100 g山慈菇第1次加入8倍量的水煎煮30 min,第2次加入4倍量的水煎煮20 min,合并滤液,进行过滤,然后将滤液浓缩至1.21 g生药/mL。2 实验方法
2.1 实验动物给药 根据成人每日临床剂量30 g,按大鼠等效剂量相当于人的6.3倍计算,且大鼠胃容量为0.875mL/100 g[6]。山慈菇组大鼠给药剂量为:山慈菇浓煎剂0.01 mL·(g·d);对照组大鼠给予等体积的生理盐水,每日灌胃1次,连续6d。
2.2 实验取材 取材当天,禁食水,在大鼠末次给药2h后,以0.015mL/g剂量的水合氯醛进行腹腔注射,麻醉大鼠,用无抗凝剂的真空采血管从大鼠腹主动脉取血,静置2 h,3000 r/min 离心10 min,取上层血清,置于56℃水浴中灭活30 min,最后,使用过滤器滤过血清进行除菌,-20℃保存备用。
2.3 实验检测方法
2.3.1 MTT法检测人乳腺癌細胞SK-BR-3细胞生长增殖情况 将人乳腺癌SK-BR-3细胞以1乘10*5/mL接种于96孔板上 ......
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