多耐药临床分离株结核分支杆菌耐药基因rpsL的克隆表达及功能的初步研究
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张万江 鲍朗 邓喜玲 吴芳 曹旭东 王晓樱 石河子大学新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室 四川大学华西医学中心基础法医学院感染免疫研究室 石河子大学药学院 石河子大学新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室 石河子大学新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室 四川大学华西医学中心基础法医学院感染免疫研究室
【摘要】制备多耐药临床分离株结核分支杆菌基因组DNA,PCR扩增其耐药基因rpsL基因和rrS基因,同时进行测序分析,结果显示该株多耐药临床分离株结核分支杆菌的rpsL基因的93、94bp处的碱基发生了突变,碱基C、C突变为T、T,使得相对应的编码氨基酸由脯氨酸(Pro)突变为亮氨酸(Leu);而rrS基因未发生核苷酸的插入、缺失或取代;进一步构建该株多耐药临床分离株结核分支杆菌耐药基因rpsL高效原核表达重组载体pGEX-λT/rpsL,所构建的重组质粒pGEX-λT/rpsL在大肠杆菌中高效表达了38kD的融合蛋白.结果提示,该株多耐药临床分离株结核分支杆菌对链霉素耐药仅仅是由于rpsL基因的个别碱基突变,是单基因型的,在国内外属首次研究发现.
【关键词】 结核分支杆菌 耐药基因rpsL 克隆 功能
【基金】国家自然科学基金资助项目(30070670)
【分类号】R52
结核病是严重危害人类健康的传染病,是我国重点控制的重大疾病之一,也是全球关注的公共卫生问题和社会问题.近年来,结核病在全球的回升及多耐药结核分支杆菌的出现,再次引起了人们的警觉,使人们重新将注意力集中到结核病发病机制和耐药结核分支杆菌的分子基础研究,特别是对耐
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摘 要：制备多耐药临床分离株结核分支杆团基因组DNA，PCR扩增其耐药基因rpsL基因和rrS基因，同时测分析，结果显示该株多耐药临床分离结核分支杆菌的rpsL基因的93、94bp处的碱基发生了突变，碱基C、C突变为T、T使得相对应的编码氨基酸由脯氨酸(Pro)突变为亮氨酸(Leu)；而rrS基因未发生核苷酸的插入、缺失或取代；进一步构建该株多耐药临床分离株结核分支杆菌耐药基因rpsL高效原核表达重组载体pGEX-λT/rpsL，所构建的重组质粒pGEX-λT/rpsL在大肠杆菌中高效表达了38kD的融合蛋白。结果提示，该株多耐药临床分离株结核分支杆菌对链霉素耐药仅仅是由于rpsL基因的个别碱基突变，是单基因型的，在国内外属首次研究发现。
关键词：结核分支杆菌；耐药基因rpsL；克隆；功能
中图分类号：Q78 R378
文献标识码：A
文章编号：1007-7847(2005)01-0043-06
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