消减杂交技术结合限制性显示技术制备K562细胞特异基因探针
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宋艳斌 马文丽 冯春琼 石嵘 毛向明 张宝 郑文岭 南方医科大学分子生物学研究所 南方医科大学分子生物学研究所 南方医科大学分子生物学研究所 南方医科大学分子生物学研究所 南方医科大学分子生物学研究所 南方医科大学分子生物学研究所 华南生物芯片中心
【摘要】建立一种简便、快速、特异的制备基因芯片探针的方法.以K 562细胞和正常人淋巴细胞作为消减对象,利用自行建立的消减方法进行消减杂交,结合限制性显示技术,分组扩增差异cD N A,回收K 562细胞特异基因片段,制作基因芯片探针.结果显示,分离到400个K 562特异的基因,片段大小均一,适于制作cD N A芯片.消减杂交技术结合限制性显示技术制备基因芯片探针,具有快速、简便、特异的特点,降低了芯片制作成本,可加速芯片的推广应用.
【关键词】 K细胞 消减杂交 限制性显示技术 基因探针 基因芯片
【基金】国家自然科学基金资助项目(39880032)
【分类号】R346;
肿瘤在发生、发展过程中,增殖周期中不同的阶段、不同的病理分期、不同的生物学行为以及在不同的诱导环境下,肿瘤细胞的基因表达谱均不同.利用基因芯片高通量、平行处理的优势比较差异基因表达谱,可从基因水平实时反映肿瘤的生长调节等信息,了解表现型和基因型的相互关系.cD N
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摘 要：建立一种简便、快速、特异的制备基因芯片探针的方法.以K562细胞和正常人淋巴细胞作为消减对象，利用自行建立的消减方法进行消减杂交，结合限制性显示技术，分组扩增差异cDNA，回收K562细胞特异基因片段，制作基因芯片探针.结果显示，分离到400个K562特异的基因，片段大小均一，适于制作cDNA芯片.消减杂交技术结合限制性显示技术制备基因芯片探针，具有快速、简便、特异的特点，降低了芯片制作成本，可加速芯片的推广应用.
关键词：K562细胞；消减杂交；限制性显示技术；基因探针；基因芯片
中图分类号：Q786
文献标识码：A
文章编号：1007—7847(2005)03-0238—04
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