嗜酸乳杆菌表层蛋白提取方法及影响因素的研究(1)

http://www.100md.com 2007年3月1日 李振梅　陈　营　安利国　邵占涛

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     摘 要：对嗜酸乳杆菌S层蛋白的提取方法进行了改进，用酸性5mol/L LiC1法，中性5mol/L LiC4法和8mol/L尿素法提取嗜酸乳杆菌的表层蛋白，考马斯亮兰法测蛋白浓度，进行常规SDS-PAGE，用Gel-Pro软件进行数据分析，得出其中酸性5mol/LiC1法提取表层蛋白百分含量最多，分析影响提取条件的因素，设置0、4、室温(25℃)3个温度梯度和10、15、20、25、30min 5个时间梯度，进行常规SDS-PAGE，检测提取表层蛋白的效果，Sephadex G—100柱分离中性5mol/L LiC1法和8mol/L尿素法提取嗜酸乳杆菌的表层蛋白获得S_[A]蛋白，酸性5mol/L LiC1法可用于分析各种表层蛋白；中性5mol/L LiC1法和8mol/L尿素法用于提取43kD_a的S_A蛋白，25℃处理15min得到最大量的表层蛋白。

    关键词：嗜酸乳杆菌；S层蛋白；酸性5mol/L LiC1法；中性5mol/L LiC1法；8mol/L尿素法

    中图分类号：Q939

    文献标识码：A

    文章编号：1007-7847(2007)01-0044-04

    黏附作为益生菌在肠道上定植并发挥益生作用的第一步至关重要，目前，对益生菌黏附作用的机理的研究集中在益生菌表层蛋白(S层蛋白)与粘液蛋白的相互作用上，益生菌表层蛋白的提取方法纷繁多样，嗜酸乳杆菌S层蛋白与细胞壁作用键是非共价键或离子键，故可利用疏水键破坏剂或电荷捕获剂来提取，早在1979年，Ma-suda K等用高浓度的尿素提取乳杆菌(Lactobacillus brevis)表层蛋白；1980年 ......

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