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编号:11608720
浮游病毒的电镜观察
http://www.100md.com 2007年3月1日 袁秀平 刘艳鸣 张奇亚
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浮游病毒的电镜观察
浮游病毒的电镜观察

    参见附件(586KB,4页)。

     摘要:直接用戊二醛固定水样中的浮游病毒,通过超速离心使已固定的浮游病毒沉淀到覆有Formvar膜和碳支持膜的铜网上,经醋酸双氧铀染色后,利用透射电镜对湖水中的浮游病毒进行观察,结果可观察到球形、杆状和蝌蚪状等形态各异的浮游病毒颗粒及球形病毒的囊膜子粒、杆状病毒的核衣壳、具有不同尾部的蝌蚪状病毒等的精细超微结构,从而建立了一种简便、快捷和高效研究浮游病毒的电镜方法。

    关键词:电镜观察;浮游病毒:超微结构

    中图分类号:Q939.48

    文献标识码:A

    文章编号:1007-7847(2007)01-0048-04

    电镜技术已广泛用于病毒的形态特征、分子结构以及与宿主细胞相互作用的研究,电镜观察可为病毒的形态、超微结构及分类定位提供最直观的依据,但要通过电镜对水样中的病毒进行观察,通常必须对水样进行浓缩和病毒分离,浮游病毒是存在于水体中的病毒,浮游病毒也是指水生态系统中的病毒,目前被普遍认为是水体微生物群落中丰富且重要的活性成分,它能调节水体中异养细菌,蓝藻和真核藻类的物种多样性和生物产量,影响生物地化循环,介导水生态系统中微生物之间的基因转换,对水环境乃至整个生态系统都具有重要影响,因此受到人们的广泛关注,近些年已有报道指出,浮游病毒存在不同的形态类群。

    从水样中分离浓缩病毒,不仅过程繁杂、耗时长、费用高,还会使水样中病毒的数量及完整性受损,可否免去分离浓缩程序,直接对水样中的浮游病毒进行制样和电镜观察呢?因此,本文着重对水样中浮游病毒样品的不同制备方法及电镜观察效果进行比较。

    1 材料与方法

    1.1 水样的采集

    将取样器浸入武汉东湖水面以下10cm处取出水样,装入收集瓶内,立即加入戊二醛(按体积比水样:戊二醛=9:1,使之终浓度为2.5%)进行固定,并迅速将固定后的水样置于4℃冰箱内保存,备用。

    1.2 制样

    方法之一:水样直接滴到铜网上,采用常规的滴染法,即把水样直接滴在覆有Formvar膜和碳支持膜的铜网上 ......

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