果蝇唾液腺特异基因CG8419多克隆抗体的制备及检测
http://www.100md.com
2011年2月1日
 |
| 第1页 |
参见附件。
周煌 唐雄卓 闵璐 陈婷芳 彭夕洋 王琨 吴秀山 王跃群 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心;
【摘要】果蝇CG8419基因与脊椎动物中TRIM45基因为同源基因.以果蝇cDNA为模板通过PCR扩增出亲水性和特异性好的果蝇CG8419基因片段,将其克隆入表达载体PET-28a,构建出重组表达质粒PET-28a-CG8419.将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导出带His标签的重组融合蛋白.通过尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融合蛋白,然后再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.Western blot实验分别验证抗体的效价和特异性.果蝇胚胎抗体染色显示该基因在果蝇唾液腺中表达.
【关键词】 CG 原核表达 多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金资助项目(30871340,31071999,90508004,30930054) 国家重点基础研究发展计划资助项目(2005CB522505)
【分类号】Q78
TRIM45基因在人类的肌肉、心脏、肝脏等组织中有表达,提示该基因可能与肌肉和心血管组织的发育有关[1,2].采用果蝇模型来研究其果蝇同源基因CG8419的功能以便更好的研究该基因的功能很有必要.在此情况下,我们制备出CG8419多克隆抗体,用制备的CG8419兔多克隆抗体对果蝇胚胎进
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2260kb)。