电穿孔转染重组杆状病毒到昆虫细胞的研究
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2013年1月1日
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陈卫东 杨靖佳 井申荣 曾韦锟 黄芬 昆明理工大学生命科学与技术学院;
【摘要】目前转染细胞时常用阳离子脂质体如Cellfectin,这种方法成本高,效果不稳定,而用电穿孔转染外源基因到昆虫细胞的文献报道极为少见.构建重组杆状病毒基因组GFP/BAC,用电穿孔法和脂质体法转染到昆虫细胞Sf9中,比较两种方法的转染效率.研究发现,两者转染效率分别为86.14%和86.53%.两种转染方法的子代重组杆状病毒能够继续转染Sf9细胞,荧光强度无明显差异.电穿孔转染效率与脂质体转染接近,但电穿孔法操作简便,周期较短,成本很低.
【关键词】 电穿孔 转染效率 重组杆状病毒 昆虫细胞
【基金】国家自然科学基金资助项目(30872398、31160193) 云南省应用基础研究项目(2007C032M)
【分类号】Q78
将杆状病毒转染到昆虫细胞中组成的杆状病毒-昆虫细胞表达系统,具有安全性高,无内毒素污染,易于筛选等特点[1],在多角体启动子控制下,能够高效稳定地表达外源蛋白并能在翻译后进行修饰、加工,已广泛应用于基础研究、医药卫生和农业技术创新等各个领域[2～4].目前在转染重组杆
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