果蝇Domeless蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备研究
参见附件。
近年来，随着对JAK/STAT信号通路研究的深入，发现其在心脏疾病发病机制中起非常重要的作用，心力衰竭、心肌肥大、以及缺血一再灌注引起的心功能障碍都与JAK/STAT信号通路密切相关。
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唐超 任恋 刘宪楚 李容 江志钢 赵阳 廖四芳 袁佳佳 莫小阳 吴秀山 湖南师范大学生命科学学院 蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室 心脏发育研究中心;
【摘要】在果蝇(Drosophila melanogaster)的研究中发现Domeless接受器参与发育期间的JAK/STAT信号调节,在心脏疾病的发生机制中发挥重要作用.为了克隆Domeless,我们利用生物信息学选择果蝇Domeless基因抗原亲水区,将扩增出的PCR片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E.coli(Escherichia coli)中后通过IPTG(Isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导融合蛋白表达,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,纯化后的His-Domeless融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.用Western blot检测抗体的效价和特异性.获得了Domeless原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗Domeless多克隆抗体,为后续Domeless功能研究奠定了基础.
【关键词】 Domeless 果蝇 原核表达 多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金资助项目(30930054)
【分类号】Q78
果蝇中Domeless与JAK/STAT(Januskinase/signal transducer and activator of transcription)信号通路密切相关[1].JAK/STAT通路是由细胞因子介导的的细胞内信号传导通路,这一重要信号通路得到了广泛关注,并进行了深入的研究,前人研究结果表明该通路进化上功能保守,同时还转
近年来，随着对JAK/STAT信号通路研究的深入，发现其在心脏疾病发病机制中起非常重要的作用，心力衰竭、心肌肥大、以及缺血一再灌注引起的心功能障碍都与JAK/STAT信号通路密切相关。
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唐超 任恋 刘宪楚 李容 江志钢 赵阳 廖四芳 袁佳佳 莫小阳 吴秀山 湖南师范大学生命科学学院 蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室 心脏发育研究中心;
【摘要】在果蝇(Drosophila melanogaster)的研究中发现Domeless接受器参与发育期间的JAK/STAT信号调节,在心脏疾病的发生机制中发挥重要作用.为了克隆Domeless,我们利用生物信息学选择果蝇Domeless基因抗原亲水区,将扩增出的PCR片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E.coli(Escherichia coli)中后通过IPTG(Isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导融合蛋白表达,Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,纯化后的His-Domeless融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.用Western blot检测抗体的效价和特异性.获得了Domeless原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗Domeless多克隆抗体,为后续Domeless功能研究奠定了基础.
【关键词】 Domeless 果蝇 原核表达 多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金资助项目(30930054)
【分类号】Q78
果蝇中Domeless与JAK/STAT(Januskinase/signal transducer and activator of transcription)信号通路密切相关[1].JAK/STAT通路是由细胞因子介导的的细胞内信号传导通路,这一重要信号通路得到了广泛关注,并进行了深入的研究,前人研究结果表明该通路进化上功能保守,同时还转
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