慢性腹泻患者菌源分析
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【摘要】 目的：通过对慢性腹泻患者的粪便进行涂片和细菌培养，检查细菌的种类、数量和所占比例，为临床提供确切可靠的病原学诊断依据。方法：选取2010年6月~2011年6月到我校附属医院就诊的持续腹泻或间歇2-4周内复发病程在两个月以上的慢性腹泻患者的粪便标本110份作涂片和细菌培养，取25份正常人的粪便标本作对比分析。结果：110份的粪便标本涂片检查发现杆菌/球菌比例失调；细菌培养除正常标本中含有的菌群外，还培养出克雷伯氏菌，金黄色葡萄球，白色念珠菌和奇异变形杆菌等其他菌群。大肠杆菌明显增加，乳酸杆菌明显减少，双歧杆菌和肠球菌较正常减少。结论：肠道菌群失调是造成慢性腹泻的重要原因，要根据病原学检查结果选择合理的治疗方法。
【关键词】 慢性腹泻；菌群失调；菌源分析
【中图分类号】 R572【文献标识码】 B【文章编号】 1007-8231(2011) 08-0743-02
慢性腹泻多是由于急性腹泻治疗不当而转变来，是由于各种原因导致的肠道菌群失调，影响肠道内维生素的合成和对蛋白质、糖、脂质的消化吸收而导致的大便次数增多和大便不成形[1]。
1资料与方法
1.1一般材料
1.1.1标本选取2010年6月～2011年6月到我校附属医院就诊的持续腹泻或间歇2-4周内复发病程在两个月以上的慢性腹泻患者的粪便标本110份作涂片和细菌培养，其中男56份，女54份，年龄21～65岁，门诊患者71份，住院患者39份，取25份正常人的粪便标本作对比分析。
1.1.2仪器与试剂使用成都瑞琦生物科技有限公司生产的血培养基、伊红美兰培养基，麦康凯培养基；采用西门子公司的德林细菌鉴定系统进行细菌鉴定；台湾贝索革兰氏染色剂； OLYMPUS显微镜。采用兰州生物制品研究所生产的诊断血清。
1.2方法
1.2.1涂片染色
所有粪便标本直接涂片后进行革兰染色，放置在油镜下镜检，认真观察并详细记录各类菌群的形态及所占比例。
1.2.2细菌培养及鉴定
将1g粪便标本加入9倍量标本的无菌生理盐水中震荡30min,然后加入生理盐水依次10倍稀释至109，取3滴进行定量接种[2]，分别接种在血培养基和麦康培养基，置于35℃孵箱中18-24h，然后观察记录培养基上各类细菌菌落的生长状况、数量、形态特征及各菌群之间的比例，菌群不明确时可挑取可疑的菌落进行革兰染色，然后分析鉴定。
1.2.3血清鉴定
对怀疑是致病大肠埃希菌、沙门氏菌、志贺菌或霍乱弧菌的菌落分别选择相应的抗血清做凝集试验。
2结果
2.1标本涂片染色镜检
110份的腹泻患者粪便标本涂片检查发现杆菌/球菌比例失调，大便常规检查发现白细胞正常或偏少，结果见表1。
2.2细菌培养
正常对照的标本中有22份同时分离出大肠杆菌(占88%)、双歧杆菌(占6%)、肠球菌(占4%)和乳酸杆菌(2%)，有3份仅分离出大肠杆菌(占87%)、双歧杆菌(占7%)和肠球菌(占6%)，慢性腹泻患者标本除以上正常标本中含有的菌群外，还分离出克雷伯氏菌，金黄色葡萄球，白色念珠菌、铜绿色假单孢菌和奇异变形杆菌等其他菌群，大肠杆菌明显增加，乳酸杆菌明显减少，双歧杆菌和肠球菌较正常减少。结果见表2。
表2慢性腹泻患者粪便标本细菌培养及鉴定结果
3讨论
造成慢性腹泻的主要原因是急性腹泻治疗不当，而根本原因却是抗生素的不合理使用。本次调查的所有慢性腹泻患者都有长时间不合理服用抗生素的经历，从而导致肠道微生态平衡失调而久治不愈。肠道正常菌群具有作为生物屏障防御病原体的作用，同时还参与蛋白质、糖、脂质的消化吸收及合成维生素等，而且有降解亚硝胺等致癌物质的作用[3]。由于某些原因而破坏了肠道内各种微生物之间的相互制约关系，使细菌的数量和种类发生改变，称为菌群失调。对本次调查在涂片镜检或细菌培养有细菌的标本进行分析显示，涂片镜检时细菌总数于正常对照相比明显减少，肠杆菌和肠球菌的比例颠倒(正常约为75∶25)，在培养鉴定的菌群中，条件致病菌如克雷伯杆菌、铜绿假单孢菌、奇异变形杆菌和白色念株菌等菌群出现优势生长。在不合理的使用抗生素和机体抵抗力下降的条件下这些细菌优势生长就会导致相关肠炎[4]。本次研究的菌群只是肠道微生态环境中的细菌极少一部分，在肠道细菌的3%以下[5]，这些细菌除去大肠埃希菌基本上都是条件致病菌，正是由于抗生素的不合理应用而导致这些细菌数量的异常增多，使肠道微生态环境失调，腹泻迁延不愈。因此，在临床治疗疾病时，要根据病原学检查结果选择合理的抗生素。
参考文献
[1]张晓炜，宋佩茹，邢军.抗生素相关性肠道菌群失调38例临床分析[J].中华医院感染学杂志 ......
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