2 方法与结果

    2.1 菌液制备方法 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，置30～35℃培养18～24h，分别取上述培养物1ml，加0.9% 的无菌氯化钠溶液9ml，10倍递增稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，置23～28℃培养24～48h，取培养物1ml，加0.9% 无菌氯化钠溶液9ml，10倍递增稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液；接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，置23～28℃培养5～7d，加入5ml含0.05% (ml/ml) 聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。吸出孢子悬液至无菌试管内。取原液1ml，加含0.05% (ml /ml)聚山梨酯80的0.9% 无菌氯化钠溶液9ml，10倍递增稀释制成每1ml 含孢子数为50～100cfu的孢子悬液。

    2.2 供试液制备 按2010年版《中国药典》一部附录微生物限度检查法之规定，取供试品100cm2，放置于无菌纸上，粘贴面朝上，用无菌纱布覆盖贴膏剂的粘贴面，然后用无菌剪刀剪碎 ......