酿酒酵母基因工程菌的构建及工艺优化研究进展(2)
22酿酒酵母工程菌发酵重要参数的优化影响酿酒酵母工程菌高密度发酵的因素很多,如培养温度、pH值、通气量、接种量、转速、摇瓶发酵时间等,在发酵培养基确定的情况下,适当的调整这些因素可获得较高产量的代谢产物。刘志友[21]通过对番茄果酒主要影响因子如初始糖度、酵母接种量、pH和温度进行了正交优化试验,结果获得了达到果酒感官理化卫生标准的番茄果酒。23酿酒酵母工程菌培养方式的筛选目前细胞高密度培养方式主要有细胞循环培养和透析培养、补料分批培养等,其中,补料分批培养对生长偶联产品和胞内产品的生产有很大的帮助。对于补料分批培养的研究是实现自动化控制的前提[19]。张根林[10]使用乙醇补料批式发酵,使得β-香树脂醇的产量提高了902%。
3存在的问题和展望
[JP3]尽管国内外学者在酿酒酵母底盘细胞中构建了许多工程菌,并成功表达外源蛋白且获得高产菌株,但依然存在一些问题值得深思:①依然存在部分外源基因不能在酿酒酵母表达系统中表达,而具体原因尚未明确;②对于较长途径中的表达效率较低;③没有彻底克服产物蛋白不均一的现象;④对于发酵过程中,有关酿酒酵母自身的乙醇耐性、耐低温、耐高渗等耐受性的机理还尚不清楚,有待研究 ......
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