栝楼桂枝汤对脑缺血再灌注大鼠肢体功能及GAP—43的影响(2)
233足失误试验足失误试验[7]是评价动物前肢定位功能的行为学实验，实验动物被放置在1个45 cm×30 cm，高于地面25cm的网格平板上，网格的尺寸是25 cm×25 cm，生理情况下，动物在网格上行进时会将它们的爪子放在网格线的交叉处，当病理条件下，动物无法正确放置它们的爪子，前肢会掉落在网格中。当爪子掉落或滑落在网格线之间，被记录为1次足失误，记录3min内，双侧前肢行走步数及其中左侧前肢的足失误次数，以足失误次数占总的前肢行走步数的百分比表示足失误评分。
24免疫荧光化学染色及图像分析最后一次行为学评价结束后，各组取5只动物，10%水合氯醛麻醉，经心脏灌注4%多聚甲醛，取脑，经20%、30%蔗糖梯度脱水后，制作30μm冠状冰冻切片。采用漂片法进行GAP-43免疫荧光染色，切片经001MPBS洗涤后，在山羊血清中室温封闭1h，然后抗GAP-43抗体(1∶400)中4℃孵育过夜，随后在荧光标记二抗中37℃避光孵育1h。最后将切片裱于玻片，用抗荧光淬灭封片剂封片。荧光显微镜400倍镜下观察并拍照，各组每例动物均拍摄2张脑片，每张切片拍摄5个不重叠的随机视野 ......
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24免疫荧光化学染色及图像分析最后一次行为学评价结束后，各组取5只动物，10%水合氯醛麻醉，经心脏灌注4%多聚甲醛，取脑，经20%、30%蔗糖梯度脱水后，制作30μm冠状冰冻切片。采用漂片法进行GAP-43免疫荧光染色，切片经001MPBS洗涤后，在山羊血清中室温封闭1h，然后抗GAP-43抗体(1∶400)中4℃孵育过夜，随后在荧光标记二抗中37℃避光孵育1h。最后将切片裱于玻片，用抗荧光淬灭封片剂封片。荧光显微镜400倍镜下观察并拍照，各组每例动物均拍摄2张脑片，每张切片拍摄5个不重叠的随机视野 ......
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