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编号:13285199
佩兰乙醇提取物对结肠癌RKO细胞的抑制作用研究(2)
http://www.100md.com 2018年8月1日 《中国民族民间医药·下半月》 2018年第8期
     2.2 SRB法检测佩兰乙醇提取物对结肠癌RKO细胞增殖抑制的影响 取对数生长的细胞,以2×104个细胞/孔的浓度接种于两块96孔板,一块为对照板(T0),一块为实验板;CO2培养箱中培养24h后,对照板(T0)取出进行SRB染色,在530nm波长下测定 OD值。染色流程如下:弃掉培养基,加入10% TCA固定液4℃条件下固定2h;蒸馏水洗涤3次后自然晾干,每孔加入100μL的4mg/ mL的 SRB溶液,室温下染色15min;弃上清,1%的醋酸冲洗5次、甩干,每孔加入100μL的10mM Tris溶液。利用DMSO溶解佩兰乙醇提取物后,用培养液稀释成不同浓度(3μg/mL、6μg/mL、12.5μg/mL、25μg/mL)的药液,且DMSO的终浓度不能超过0.5%。实验板中加入上述配制好的不同浓度的药液作为实验组(T),并设对照组(C)(加入200μL培养基),每组5个复孔,CO2培养箱中培养24h后进行 SRB染色并测量OD值,按以下公式计算肿瘤生长抑制率。

    肿瘤生长抑制率(%)=[1-OD(T)-OD(T0)OD(C)-OD(T0)]×100%

    2.3 倒置显微镜观察佩兰乙醇提取物对RKO细胞形态的影响 细胞接种于两块96孔板(2×104个/孔) ......
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