不同加工方法对麦冬总多糖含量的影响
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【摘要】目的：比较不同方法加工的麦冬，匍匐型麦冬与直立型麦冬总多糖含量。方法：采用超声波提取法提取多糖，苯酚-硫酸法测定吸光度，并计算总多糖含量。结果：微波加工麦冬总多糖含量最高，直立型麦冬总多糖含量高于匍匐型。结论：微波加工简单、快捷，对药材成分损失较小，可作为麦冬产地加工一种绿色新方法。
【关键词】麦冬；加工方法；总多糖
【中图分类号】R932【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)08-0023-02
中药麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬Ophiopogo japonicus(Thunb.)Ker-Gawl.干燥块根。具有养阴生津、润肺清心的功能，可用于热病伤律、心烦口渴等症。药理学研究表明，麦冬及其制剂具有一定的抗心肌缺氧、抗心肌缺血作用，临床用于治疗冠心病、心绞痛取得一定疗效[1]。麦冬皂苷、麦冬总多糖可能是麦冬抗心肌缺血的主要有效成分,其中麦冬多糖有较显著的抗心肌缺血作用。新鲜的麦冬不易保存，容易腐烂，因此应及时加工。传统加工方法耗时过长，工序繁杂，容易造成药材有效成分的大量损失，且加工中残留在药材内的硫残留物对人体有害。因此，寻找新的绿色加工方法是该行业目前亟需解决的问题。本实验以2007年采收样品为原料，运用不同方法进行产地加工，采用超声波提取法提取多糖类成分，通过紫外分光光度计测定含量分析[2]，比较总多糖含量，旨在为麦冬加工方法的筛选提供科学依据，对该产业的发展具重要意义。
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1材料与方法
1.1材料2007年新鲜麦冬。采自四川绵阳市三台县麦冬GAP生产基地，经西南交通大学张兴国副教授鉴定为百合科沿阶草属植物麦冬Ophiopogo japonicus(Thunb.)Ker-Gawl的干燥块根。
1.2试剂苯酚(分析纯)(重庆天府精细化学品厂)；无水葡萄糖(分析纯)(天津市科密欧化学试剂开发中心)；浓硫酸(95-98%，分析纯)(成都金山化学试剂有限公司)；乙酸乙酯、丙酮(含量均≥99.5，分析纯)(天津市致远化学试剂有限公司)。
1.3仪器设备KQ5200B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；TU-1901型双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)；JY3002型电子天平(0.0001g)(上海精密科学仪器有限公司)；SHB-III循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；RE-52C型旋转蒸发仪(上海青浦沪西仪器厂)。
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2实验方法与结果
2.1葡萄糖标准曲线的制作精密称取105℃下干燥至恒重的葡萄糖1.0300g，加去离子水溶解并定容至100ml。吸取0.00ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml葡萄糖溶液稀释至50ml，用移液管各取2ml放入50ml锥形瓶中，再用移液管移取1ml苯酚溶液至锥形瓶中，边摇边滴加5ml浓硫酸，放置5min，100℃水浴加热15min，迅速冷却后在460nm-600nm波长段测定吸光度，最终取491nm附近的最大吸光度。以对照浓度X(㎎y•mL-1)对吸光度Y进行线性回归，得回归方程为Y= 1.4397X+ 0.0046，r=0.9995(见图1)，葡萄糖在0.206～1.030㎎•mL范围内线性关系良好。
2.2供试品吸光度测定精密称取干燥的麦冬多糖约20mg，置100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密吸取贮备液5ml，稀释至100ml，取其中的2ml置试管中，照标准曲线的制备项下的方法测定吸光度。
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2.2.1正交实验设计采用样品水料比(A)、提取温度(B)和提取时间(C)为考察因素，以测得样品中总多糖含量为考察指标，采用L9(33)正交表进行实验，见表1。
结果可见各因素影响程度大小为C > A > B，其中对提取效果影响最小的因素为提取温度,超声时间有显著影响,A3B3C2为各因素最佳水平，即水料比40：1，提取温度设定为70℃，每次超声时间为60min。
2.2.2单因素实验在其他条件相同的情况下，采用超声提取次数作为考察因素，分别测得超声提取一次(每次30min，输出功率100%)，两次(每次30min，输出功率100%)、三次(每次30min，输出功率100%)、四次(每次30min，输出功率100%)时样品的吸光度。经比较超声提取三次为该因素的最佳条件，所得结果与正交实验互相补充。
2.3按不同方法加工的麦冬总多糖含量的测定
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2.3.1供试品的采集与加工随机选取2007年麦冬正常块根，将整体麦冬按照川麦冬品种分为直立型(Z)和匍匐型(P)比较，并按下列方法进行加工。带泥块根：各3株，称去带泥块根重量，用手尽量除去块根泥土后再称重，样品先110℃烘15min杀酶，再在60℃烘干，在烘干过程中通过搓揉除净块根泥土，称干重。水洗麦冬块根前处理：从GAP基地产麦冬P、Z中分别随机抽取麦冬若干，用自来水冲洗干净并滴干水后，再称样品总重量，剪去麦冬须根并称重量，选出麦冬叶片等杂质并称重量，麦冬混合块根做下面处理。分别取水洗麦冬块根(P、Z)各50g，进行以下实验处理：基本处理方式：无硫，红外线干燥，日晒，阴干，微波处理后烘干块根，切片。实验程序：去鲜块根50g→样品加工处理后称重(g)→干燥后称重(g)①水洗麦冬鲜块根的加工处理如下：烘干1： P、Z各50g块根，先110℃烘15min杀酶，再在60℃烘干；烘干2： P、Z各50g块根，块根剪片后再称重，先110℃烘15min杀酶，再在60℃烘干；烘干3： P、Z各50g块根，60℃烘干；烘干4： P、Z各50g块根，块根剪片后再称重，60℃烘干；②水洗块根微波处理：微波1: P、Z各50g块根，30sec处理块根后, 60℃烘干；微波2: P、Z各50g块根，1min处理块根后, 60℃烘干；微波3: P、Z各50g块根，2min处理块根后, 60℃烘干；水洗块根冰冻处理：冰冻处理24h： P、Z各50g块根，先110℃烘15min杀酶，再在60℃烘干；冰冻处理24h： P、Z各50g块根，60℃烘干。将麦冬分类编号(见表3)、粉碎、过20目筛。
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2.4结果按上述方法制备20种供试液，分别测定吸光度值，并计算出总多糖含量，结果见表4。
①通过纵向比较发现麦冬总多糖含量Z8和P6在两品种中最高，即匍匐型块根适于水洗后微波处理30sec，60℃烘干的加工方法；直立型块根适于水洗后2min微波处理，60℃烘干的加工方法。②通过横向比较发现除第6组样品外，其余样品均显示直立型麦冬总多糖含量明显高于匍匐型。
3讨论
实验结果显示微波方法加工的麦冬总多糖含量明显高于其他加工方法处理的麦冬，其主要原因可能是其他方法长时间高温烘制破坏了部分多糖有效成分，造成损失。据文献报道[6]，杭麦冬多糖含量要高于川麦冬，说明麦冬的产地不同可以影响其有效成分。本实验的结果，进一步证明麦冬的种质差异对其有效成分也有影响，并为项目主题麦冬良种的选育提供实验依据。本实验主要以总多糖含量这一指标作为筛选麦冬加工方法的标准，适用于其他有效成分的加工方法有待于在今后的研究中进一步地探索。
参考文献
[1]林晓，徐德生.麦冬多糖的单糖组成研究[J].中草药，2005,36(10)：1488-1490
[2]王丽娟,王勇.麦冬药理作用与临床应用研究进展[J].中华医学研究杂志,2005,5(9):885-887.
(收稿日期：2009.02.13), 百拇医药(李敬安 张 琨 张兴国)