亚硫酸氢钠穿心莲内酯的抗炎解热镇痛作用研究
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【摘要】目的：研究亚硫酸氢钠穿心莲内酯的抗炎、解热、镇痛作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳肿胀和醋酸所致小鼠毛细管通透性增高模型观察其抗炎作用，采用大肠杆菌诱发家兔发热模型观察其解热作用，采用热板法及扭体法观察其镇痛作用。结果：与对照组比较，亚硫酸氢钠穿心莲内酯160.0、80.0和40.0mg•kg-1可明显抑制二甲苯诱导小鼠耳肿胀；亚硫酸氢钠穿心莲内酯160.0、80.0和40.0mg•kg-1可明显抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性的增高。结论：亚硫酸氢钠穿心莲内酯具有一定抗炎、解热、镇痛作用。
【关键词】亚硫酸氢钠穿心莲内酯;抗炎;解热;镇痛
【中图分类号】R282.6【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)12-0005-02
穿心莲内酯(Andrographolide)系自爵床科植物穿心莲中提取得到的二萜内酯类化合物，是中药穿心莲的主要成分之一，具有解热、抗炎、抗菌、抗病毒等功效。临床多用于上呼吸道感染、急性菌痢、胃肠炎、感冒发热及高血压等心血管疾病的治疗[1]。以天然产物中的有效成分为先导化合物，进行结构修饰和改造，是发现新药的重要途径。为了研究亚硫酸氢钠穿心莲内酯的主要药效，我们对其进行了镇痛、抗炎、解热等实验研究，旨在为临床应用进一步提供理论及实验依据。
1材料
1.1实验动物昆明种小鼠，体重18～22g；家兔2.0～2.5kg，购自安徽医科大学实验动物中心，合格证号：皖医实动准01号；实验室饲养温度：22±2℃。
1.2药品与试剂亚硫酸氢钠穿心莲内酯，安徽先锋制药提供，批号20031208；莲必治注射液，无锡山禾药业，批号20031126；二甲苯，徐州试剂二厂，批号980507；冰醋酸，徐州试剂总厂，批号990702；大肠杆菌ATCC35218，安徽医科大学附属医院检验科提供。
1.3实验仪器756MC紫外分光光度计；TGL-16H高速离心机；FA1004天平。
1.4统计学分析采用SPSS软件11.0进行统计学分析，实验数据量反应资料均以均值±标准差(±s)表示，组间比较采用完全随机设计t检验，给药前后比较采用配对t检验的方法。
2实验方法
2.1抗炎作用
2.1.1二甲苯诱导小鼠耳肿胀模型[2]取昆明种小鼠50只，♀♂各半，体重20±2g，随机分为5组，每组10只，即对照组、亚硫酸氢钠穿心莲内酯大、中、小三个剂量组(160.0、80.0和40.0mg•kg-1)、阳性药组(莲必治注射液80mg•kg-1)。肌内注射给药，每天1次，连续3d。于末次给药后1h，在小鼠右耳两面涂100%二甲苯0.03ml，左耳为对照，3h后将小鼠颈椎脱臼处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm打孔器分别在同一部位打下圆耳片，用电子天平称重，以两耳重量之差作为肿胀度。
2.1.3醋酸所致小鼠毛细管通透性增高模型[3]取小鼠50只，♀♂各半，共分5组，每组10只，即对照组、亚硫酸氢钠穿心莲内酯大、中、小三个剂量组(160.0、80.0和40.0mg•kg-1)、阳性药组(莲必治注射液80mg•kg-1)。肌内注射给药，每天1次，连续3d，于末次给药后1h，每鼠尾静脉注射1%伊文思蓝生理盐水0.1ml•10g-1，随即ip0.7%冰醋酸0.1ml•10g-1。20min后脱臼处死小鼠，切开腹部皮肤肌肉，用6ml生理盐水分数次洗涤腹腔，吸管吸出洗涤液，3000rpm离心15分钟，取清液于590nm处比色测定吸光度。
2.2解热作用
2.2.1大肠杆菌诱发家兔发热模型[3]实验前家兔停食2h，将肛表插入肛门内放置4分钟，以测定家兔的基础体温，间隔45分钟，重复测定一次，弃除2次温差大于0.2℃的家兔，耳缘静脉注射大肠杆菌液(1×106个)，5小时后剔除体温升高不到1℃的家兔。将筛选合格的40只家兔，♀♂各半，随机分为5组，每组8只，即对照组、亚硫酸氢钠穿心莲内酯大、中、小三个剂量组(80.0、40.0和20.0mg.kg-1)、阳性药组(莲必治注射液40mg.kg-1)。除对照组外，各组耳缘静脉注射相应药物，并于给药后45、90、150分钟分别测定家兔体温1次，计算家兔各个时间的温度与其初始体温的差值，即为体温的变化值，若为负值，计为0℃，计算各组体温变化值的平均值及标准差，进行t检验对及校正t检验以观察药物的降温作用。
2.3镇痛作用
2.3.1小鼠热板舔足反应模型[3]实验前将♀小鼠置于55℃恒温水浴金属板上，以小鼠舔右后足为疼痛反应指标，记录小鼠舔足反应潜伏期为基础痛阈(剔除基础痛阈小于5S，大于30S的小鼠)，将筛选的50只♀小鼠随机分为对照组，亚硫酸氢钠穿心莲内酯大、中、小剂量组(160.0、80.0和40.0mg.kg-1)及阳性药组(莲必治注射液80.0mg.kg-1)，每组10只，各组小鼠肌内注射给药，共3天，各组小鼠于最后一次给药1h后，按同法测定小鼠舔足反应潜伏期。
2.3.2小鼠扭体反应模型[3]取小鼠50只，♀♂各半，随机分为5组，每组10只，即对照组、亚硫酸氢钠穿心莲内酯大、中、小三个剂量组(160.0、80.0和40.0 mg.kg-1)、阳性药组(莲必治注射液80 mg.kg-1)。各小鼠肌内注射给药，共3天，于最后一次给药后1h，实验小鼠ip0.7%冰醋酸0.1ml.10g-1,记录15min内小鼠扭体次数。
3实验结果
3.1抗炎作用
3.1.1亚硫酸氢钠穿心莲内酯对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀的影响实验结果表明，与对照组比较，亚硫酸氢钠穿心莲内酯160.0、80.0和40.0mg•kg-1可明显抑制二甲苯诱导小鼠耳肿胀，结果见表1。
3.1.2亚硫酸氢钠穿心莲内酯对小鼠毛细血管通透性的影响试验结果表明，与对照组比较，亚硫酸氢钠穿心莲内酯160.0、80.0和40.0mg•kg-1可明显抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性的增高，结果见表2。
3.2 解热作用
3.2.1亚硫酸氢钠穿心莲内酯对大肠杆菌诱发家兔发热的影响实验结果表明，与对照组比较，亚硫酸氢钠穿心莲内酯80.0和40.0mg•kg-1可显著降低大肠杆菌诱发的家兔发热，结果见表3。
3.3镇痛作用
3.3.1亚硫酸氢钠穿心莲内酯对小鼠热板反应的影响实验结果表明，与给药前及对照组比较，亚硫酸氢钠穿心莲内酯160.0和80.0mg.kg-1组可显著延长小鼠舔足反应潜伏期。
3.3.2 亚硫酸氢钠穿心莲内酯对小鼠扭体反应的影响实验结果表明，与对照组比较，亚硫酸氢钠穿心莲内酯大剂量组160.0 mg.kg-1可减少冰醋酸引起的小鼠扭体反应。
4讨论
亚硫酸氢钠穿心莲内酯160.0、80.0和40.0mg•kg-1可显著抑制二甲苯诱导的小鼠耳肿胀程度和醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高 ......
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