辣蓼醇提液对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg的影响(2)
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1.2.2 磷酸盐缓冲溶液PBS的配制 称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4 和1.8g K2HPO4溶于800 ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L，再经高温高压(121℃，30min)灭菌后，保存于4℃冰箱中待用。
1.2.3 消化液的制备 称取0.25g胰酶(sigma-aldrich)，加入到100ml PBS溶液中，搅拌混匀，避免出现泡沫(损坏蛋白)，过滤除菌，置于4℃冰箱中待用。
1.2.4 HepG2.2.15细胞株的复苏与培养 从液氮容器中取出细胞株HepG2.2.15的冻存管，直接浸入37℃温水中，并不时摇动令其细胞株尽快融化;从37℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，并加入10倍以上的培养液，混匀，1000rpm/min离心5min，弃去上清液，加入DMEM完全培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养，根据细胞生长情况，1～3d 更换培养液。细胞长满培养瓶后，将细胞进行传代，吸弃原培养液，用0.25%的胰酶对细胞进行消化，再用完全培养基终止消化，轻轻吹打成单细胞，按1∶3传代 ......
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