1 仪器与材料

    1.1 仪器 LC-20AT高效液相色谱仪(日本岛津公司)；岛津 LC solution工作站、DV215CD 型1/10万分析天平(奥豪斯公司) ；Milli-Q 型超纯水仪(美国Millipore)；高压蒸气灭菌锅(北京发恩科贸有限公司)。

    1.2 材料 乙腈(色谱纯，德国MERCK公司)；95%乙醇，三乙胺，磷酸(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)。钩吻(生品)采集于福建省宁德市霞浦县，经福建中医药大学大学杨成梓教授鉴定为马钱科胡蔓藤属植物Gelsemium elegans (Gardn. et Champ.) Benth.。

    2 方法

    2.1 样品制备

    2.1.1 高压蒸汽灭菌样品制备 平行称取3份干燥的钩吻粉末10g，粉碎(过10目筛)，装入三角锥形瓶，加20mL水浸润至透，加清洁棉塞，牛皮纸扎口。0.2 MPa蒸汽，121℃灭菌20min。放凉后，置于湿度90%，温度28℃培养箱内。

    2.1.2 低温间歇灭菌样品的制备 平行称取干燥的钩吻藤茎10g，粉碎(过10目筛)，分别装入三角锥形瓶 ......