黄曙方，李 萍，丁 红，刘 珍，肖定璋，陈 景，陈少贤，孟锦绣，余细勇

    由于目前遗传病尚无有效的治疗方法，在出生前对胎儿进行检查，降低遗传病的发生对家庭、社会造成的危害显得尤为重要。随着产前诊断的广泛开展，预防了大量的严重先天性出生缺陷儿的出生。细胞遗传学诊断是应用最广泛且非常准确的产前诊断方法，最常用的为羊水及脐血染色体的产前诊断。现对2003年6月—2011年12月进行细胞遗传学产前诊断的1 945例病例进行分析，探讨染色体异常与年龄、孕周、手术指征、手术方式、胎儿结局等临床特点的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择在我院接受产前诊断有指征的孕妇1 956例，孕妇年龄20～45岁，孕周为16～39周，其中16～23+6周者1 270例，24周及以上者686例。经知情同意签字后行羊膜腔穿刺或脐血管穿刺。

    1.2 方法

    1.2.1 羊水培养及染色体分析的方法 16～23+6周者行羊水穿刺，24周及以上者行脐血管穿刺。在无菌条件下B超定位后行羊膜腔穿刺术，开始1 ml羊水弃去，再抽取羊水20～25 ml分装3支Falcon无菌离心管中1 800 r/min离心10 min，弃上清，每管留细胞沉淀及羊水0.5～1.0 ml，置于4 ml羊水完全培养基(GIBCO的A mino MAXTM-Ⅱ Complete，或以色列的BIO-AMF-2)，37 ℃ 5%CO2培养箱中静止培养5～7 d后，在倒置显微镜下观察，出现散在梭状细胞贴壁生长，则换液。以后每天观察，当有3个以上较大克隆(5倍镜下克隆占满整个视野)且克隆中有较多透亮的圆形细胞时即可收获。在收获前3～4 h加入秋水仙素，用0.5% trypsin-EDTA消化3 min左右，专用刮刀刮下细胞，2 000 r/min离心，弃上清，0.075 mol/L氯化钠低渗15 min，用3∶1甲醇∶冰醋酸预固定和固定后，滴片，常规G显带。每例标本按照ISCN(1995)标准，油镜下数20～30个中期分裂象，发现异常或嵌合体翻倍，必要时脐血染色体再次确认，分析5个核型。

    1.2.2 脐血培养及染色体分析方法 在超声引导下行脐血管穿刺术，取脐血2 ml，置于肝素钠抗凝的一次性取血管中，取0.5 ml接种于“益生菌”细胞培养液(5 ml) ......