张俊霞，徐金升，王双宇，白亚玲，张胜雷，崔立文，张慧然

    心血管疾病(cardiovascular disease，CVD)是慢性肾脏病(chronic kidney disease，CKD)患者的主要并发症之一[1-2]，血管、心脏瓣膜和心肌钙化是导致CKD患者发生CVD的重要原因。流行病学调查显示，40%的CKD患者发生血管钙化[3-4]。血管钙化是由多种细胞、分子参与的类似于骨形成和骨质疏松发生的主动调节过程，是预测CVD病死率的一个独立危险因素[5]，但其发生机制迄今尚未完全阐明。血管平滑肌细胞是血管中膜最主要的细胞成分，其发生类成骨/成软骨样的表型转化是血管钙化的关键环节，其特点是出现骨源性基因的表达上调，尤其是核心结合因子α1(core binding factor α1,Cbfα1)被视为表型转化的标志物。随着对血管钙化研究的逐渐深入，发现镁离子对血管钙化有保护性作用[6-8]，但目前尚不清楚镁离子对CKD患者的血管钙化是否有保护作用。为此，本研究建立了慢性肾衰竭大鼠血管钙化模型，通过外源性补充镁离子，观察其对血管钙化及弹性功能的影响，并对其机制进行探讨。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 SD大鼠，32只，雄性，5周龄，购自河北医科大学实验动物中心，合格证号：1210076。

    1.2 主要仪器和试剂 甲基纤维素、硫酸腺嘌呤(美国sigma公司)；动物饲料(北京华阜康生物有限公司)；RNA提取试剂盒、RNA反转录试剂盒(美国thermo公司)；钙水平测定试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司)；Unicel Dxc800全自动生化分析仪(Beckman公司)；所用引物由生工生物工程(上海)股份有限公司根据设计合成(见表1)。

    表1 引物序列

    注：Cbfα1=核心结合因子α1；GADPH为内参基因

    1.3 实验方法

    1.3.1 分组及造模方法 将大鼠采用随机数字表法均分为4组，即对照组(A组)、慢性肾衰竭血管钙化组(B1组)、低镁组(B2组)、高镁组(B3组)。参照文献[9]制备大鼠血管钙化模型,将32只健康雄性SD大鼠适应性喂养高磷饲料2周后进入实验。A组给予1.5%甲基纤维素6 ml/kg在1～3周时每天灌胃，4～15周时给予高磷饮食(P：1.2%、Ca：1%、 Mg：0.05%) ......