硫化氢对高脂诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏炎性反应的作用
王 丽,王兰辉,孟翠巧,李立萍,宋广昊,任路平,李国风·论著·
硫化氢对高脂诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏炎性反应的作用
王 丽,王兰辉,孟翠巧,李立萍,宋广昊,任路平,李国风
目的 观察硫化氢(H2S)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠炎性因子水平的影响,探讨H2S防治NASH的可能机制。方法 2013年1月—2014年7月选用SPF级雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法分为对照组、NASH模型组、硫氢化钠(NaHS)干预组,各20只。对照组给予普通饲料,NASH模型组给予高脂饲料,NaHS干预组给予高脂饲料的同时腹腔注射H2S供体NaHS(56 mg·kg-1·d-1),对照组和NASH模型组每日腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。8周后处死所有大鼠,留取静脉血及肝脏组织。检测血清及肝脏生化指标〔血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)﹑天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)及肝脏组织TG、TC〕﹑血浆及肝脏组织H2S水平、肝脏组织氧化应激指标〔丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)〕;HE染色观察肝脏组织病理学变化;检测肝脏组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6) mRNA表达水平及肝脏组织TNF-α、IL-6、核因子κB抑制因子α(IκBα)、核因子κB p65(NF-κB p65)表达水平。结果 NASH模型组和NaHS干预组血清ALT、AST、TG、TC水平及肝脏组织TG、TC水平均高于对照组,且NaHS干预组以上指标均低于NASH模型组(P1 材料与方法
1.1 材料 健康雄性SPF级SD大鼠60只,体质量(150±10)g,由中科院上海实验动物中心提供。普通饲料和高脂饲料购自上海前尘生物科技有限公司。NaHS、Access RT-PCR Introductory System、M-MLV反转录酶购自美国Promega公司。丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)﹑总胆固醇(TC)﹑丙二醛(MDA)﹑超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。BCA法蛋白定量试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。TNF-α、IL-6、核因子κB抑制因子α(IκBα)、核因子κB p65(NF-κB p65)、β肌动蛋白(β-actin)多抗购自美国Santa Cruz公司。紫外分光光度计购自美国UNICO公司。
1.2 方法
1.2.1 分组、造模及给药 2013年1月—2014年7月,60只SD大鼠适应性喂养2周后 ......
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