1,25(OH)2D3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响
唐玉玲,张春江,马 莉,贾 林,杨 锐,杨晓萍1,25(OH)2D3对人系膜细胞增殖及PI3K/Akt信号通路的影响
唐玉玲,张春江,马 莉,贾 林,杨 锐,杨晓萍
【摘要】目的观察1,25-二羟维生素D3〔1,25(OH)2D3〕对人系膜细胞(HMC)增殖及Akt、mTOR表达的影响,探讨PI3K/Akt信号通路在1,25(OH)2D3对HMC增殖调控中的作用。方法体外培养HMC,取传代培养至第3~7代细胞分为4组:正常对照组(N组)、1,25(OH)2D3组(10-8mol/L,VD组)、PI3K抑制剂干预组(LY294002 2 μg/ml,LY组),LY294002(2 μg/ml)联合1,25(OH)2D3组(10-8mol/L)组(LY+VD组),干预48 h,倒置相差显微镜观察各组细胞生长,CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞周期时相分布,Western blotting检测各组Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达的情况。结果各实验组吸光度值(A值)比较,差异有统计学意义(F=281.641,P0.05)。各实验组G1期、S期和PI比较,差异均有统计学意义(P0.05)。各实验组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR灰度值比较,差异有统计学意义(P
2结果
2.1各实验组HMC生长情况各实验组分别干预HMC 48 h后,N组HMC:胞体呈长梭形、不规则星形或树枝状,胞核居中,圆形或卵圆形,较清晰,见图1A(本文图1、图2的彩图见本刊官网www.chinagp.net电子期刊相应文章附件)。VD组HMC:少数胞体皱缩,体积变小,核浓缩成点状,胞质浓缩甚至出现空泡,部分细胞漂浮(见图1B)。LY组和LY+VD组:与N组相比,细胞核数目明显减少,胞体呈长梭形突出或消失(见图1C、1D)。

注:A=N组,B=VD组,C=LY组,D=LY+VD组
图1各实验组HMC生长情况(×200)
Figure 1Proliferation of human mesangial cells by the intervention of each group
2.2各实验组HMC增殖情况各实验组A值比较,差异有统计学意义(F=281.641 ......
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