崔姗姗，高小玲，王慧慧，吴耀松，尹素改，陈玉龙

    ·论著·

    ·中医·中西医结合研究·

    六君子汤提取物抑制食管癌Ec9706细胞增殖及其对信号转导和转录活化因子3信号通路的影响

    崔姗姗，高小玲，王慧慧，吴耀松，尹素改，陈玉龙

    目的研究六君子汤提取物对食管癌Ec9706细胞增殖的抑制作用及其对信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号通路的影响。方法于2013—2015年，采用70%乙醇提取六君子汤，正丁醇、乙酸乙酯及水提法过夜萃取，用MTT法观察提取物对Ec9706细胞活性的影响，选取最优提取部位，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法观察六君子汤乙酸乙酯部位对Ec9706细胞分泌相关细胞因子〔包括白介素6(IL-6)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)〕的影响，采用Western-blotting法测定六君子汤乙酸乙酯部位对食管癌Ec9706细胞STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达的影响。结果对照组、六君子汤70%乙醇部位、六君子汤正丁醇部位、六君子汤水提部位Ec9706细胞OD值比较，差异有统计学意义(F=448.90，P六君子汤70%乙醇部位>六君子汤水提部位。六君子汤乙酸乙酯部位Ec9706细胞OD值比较，差异有统计学意义(F=19.78，P1 材料与方法

    1.1材料

    1.1.1实验时间与实验材料2013—2015年，人食管鳞癌细胞株Ec9706，由河南中医学院分子生物中心提供，本实验室传代培养。

    1.1.2实验药品六君子汤的药物组成：人参3.0 g、生白术4.5 g、茯苓3.0 g、生甘草3.0 g、陈皮3.0 g、清半夏4.5 g。上述药物均购于北京同仁堂郑州药店有限责任公司，经河南中医药大学苗艳艳副研究员鉴定皆为正品。

    1.1.3主要试剂95%乙醇分析纯(天津市科密欧化学试剂有限公司)，乙酸乙酯分析纯、正丁醇分析纯(天津富宇精细化工有限公司)，胰蛋白酶消化液(Solarbio公司，批号：20130424)，胎牛血清(Gibco公司，批号：1133067)，RPMI Medium1640(Solarbio公司，批号：20130416)，四甲基偶氮唑盐(MTT，Solarbio公司，批号：M8180)，二甲基亚砜(DMSO，Amresco，批号：302A0315)，IL-6、转化生长因子β1(TGF-β1)、VEGF酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测试剂盒(Boster公司，批号：13110971028、2271072108、25310561028) ......